关于细胞周期时长检测

Sakya

各位大侠，如果我想检测某种组织细胞细胞周期G1，S，G2，M四个期以及整个细胞周期的时间长度，请问需要采用什么实验技术？

hanyl

记得翟中和主编的《细胞生物学》一书中提到两种方法，你可以看看。

knowtumor

一次测定肯定不成。所以，不是机器本身的问题，而是实验设计的问题。巧妙构思，将现有的技术方法结合起来，也应该可以测。& W# J8 ~5 k2 R; Q% P; D

6 q6 A% `. A; C" x( z1 Z8 [$ a问题是，当你的结果与现有的观点不一致时，你会遇到大麻烦。; r5 H* G0 ^, ?+ i

- p: D9 B/ x, K  u2 j. v说白马是马的论文，你可以去数白马有多少根白毛，这被认为是好论文，容易发表，起码没有政治错误。“红学”研究，就有数大观园中多少厕所的。
5 e, I# w* Q+ ~! E
& d9 A: C* g) K8 \( k6 ^  j  o说“白马非马”的论文，无论论证再严密，很难发表。但是，说白马是马的人，历史永远记不住他。而说白马非马的人，历史却忘不了。
0 ?) X: z* P1 A( b0 m! L! [. A  w0 R' s/ @6 N1 f0 L
100人中，当99人都说是白马，说是黑马的人即便对也是错。因为他对了，99人就是错的。民主社会，99比1啊！
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+ v4 b3 l  E' [& b“假到真时真也假”。大家还记得去年在这个论坛上讨论的Nature Mar 28，2012的文章。世界著名实验室发表在著名杂志的约90%的肿瘤临床前研究的关键性结果重复不出来。更有意思的是，在IF6-19这一档次的杂志中，重复不出的论文的被索引率远高于可被重复的论文（169:13）。其推论就是这句红楼梦中的名言。. s+ ~5 H0 U, A2 _
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哈佛大学的某任校长有句给本科生的忠告，“教科书中50%的内容可能是错误的。只是我们不知道是哪50%". 这位校长的话，有人说是至理名言，有人说是搞科研的老油条。9 t" Z1 z# E& c1 J
哲学上，没有否定，就没有进步。+ R6 l# y1 ]; i4 i1 L; k  c2 v

Sakya

能不能把现在的流式细胞仪改进一下，让它可以测定细胞周期各期时间长度？

Sakya

thanks

knowtumor

H3-Thymidine 可用BrdU取代。( T# L+ L2 ]3 X& {( M# n" R% }/ g5 B: J# I

" K) S- C) {! `* ]- ]比如小鼠肿瘤，一次性注射BrdU,间断取材。30 min, 1hr, 2h, 4h, 6hr,12 hr,24h, 48hr, 96h; 肿瘤的细胞周期偏长，一般在20-100hr。有超过100hr的。
  \' H, O: C; ~! l2 v- P4 E) e" M# B  H: V0 I
将各标本制备石蜡切片，免疫组化做BrdU染色。计算Mitotic figure中BrdU的阳性率。做动态曲线图，可计算出。( N6 Z0 [- B4 b

' U7 K! b. q6 r' p/ \

Sakya

楼上能帮我设计一个简易的测定细胞周期时长的方法吗？

knowtumor

It is a lost art.
( o) p8 C# G( U

Sakya

现在人们用什么方法检测细胞周期时长呢？？？

knowtumor

80年代和90年代初的时候H3-TDR还很多人用。现在恐怕没人用了，谁还卖？