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楼主: 湖南干细胞
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脐带组织块贴壁法求助   [复制链接]

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发表于 2013-2-13 16:51 |显示全部帖子
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-2-13 17:09 编辑
4 W8 Y; j  v5 `# W% w! x- J
  }! k/ y: q1 \' _+ [2 K回复 老姜 的帖子, {( H+ C1 L7 X2 d# \" k

6 A+ H1 |0 N' p& J7 O谢谢,有几天没上网了。很抱歉,当时没有看到回复,比较心急,2.8号那天,我去除了组织块,瓶底有很多白色物质,那时细胞还没有长出触角,后来细胞就不长了。2.11的时候,发现瓶底的白色物质溶解在培养液中了。3 ]4 r7 S4 B0 W% U# K2 Q
发现没什么细胞。
( O+ I) q7 u/ _( ]! w' Y是不是污染了?下次贴壁法去除组织块后,那些溶解的白色物质如何处理?
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发表于 2013-2-13 17:50 |显示全部帖子
2.7日贴壁法养了脐带间充质,2.11日可见大量小圆形细胞,换液。2.12可见某角落有少量散在分布贴壁的细胞,求鉴定是否为间充质?

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发表于 2013-2-15 10:43 |显示全部帖子
回复 老姜 的帖子  R0 x5 K! {5 `) D+ T9 N
- T; c  J( l# a* w9 I, a
谢谢指点,醍醐灌顶。

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发表于 2013-2-15 11:10 |显示全部帖子
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回复 湖南干细胞 的帖子7 {( _2 k) z  ]  G) n9 J
9 i$ t) K' o/ p3 j
以上是2.7号贴壁法培养的细胞,分别是2.12和2.11号的照片,请教是否为间充质细胞?谢谢。
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发表于 2013-2-15 20:55 |显示全部帖子
回复 老姜 的帖子2 W" _7 O. i5 a2 W: L

4 y* f+ X5 w; Q+ U好的,我要再接再励。

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发表于 2013-2-28 15:26 |显示全部帖子
回复 xiaoming210 的帖子
; ^% n* p. V1 U& h% k% }% l! M) b0 e: f" H
谢谢。

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发表于 2013-2-28 15:27 |显示全部帖子
谢谢各位指点。

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发表于 2013-3-5 15:59 |显示全部帖子
回复 老姜 的帖子, K1 V# L1 a) ~# h* S% P$ s$ i+ E
. e! Q9 d6 e8 ~2 k
2.26日做了一次组织块贴壁法培养,12小时后添加培养液时就基本上漂浮了,但是还是爬出来很多细胞,3.2日1/3量换液,拍照如上1。3月5日,3月5日镜下观察基本上没细胞了,只有碎片照片2,培养瓶里的组织块全部都漂浮,部分发黄,培养液颜色变得很淡,后2张照片所示。
" ]7 i: J( u, Q6 k- U1 \这次本来爬出很多细胞,结果还是细胞死亡了,是不是培养液换得不够,细胞营养不足?
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发表于 2013-3-6 17:30 |显示全部帖子
回复 老姜 的帖子
( ]$ ?' l- Z0 t" `1 o' J* y  {% {) n/ b% o+ H* r9 L
我的组织块贴壁不紧,9小时,第1次添加培养液时就基本上全飘了。后两张是爬出来的细胞,肯定不是皿底的东西,是爬出来的细胞,最一张是细胞碎解了。
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发表于 2013-3-6 17:36 |显示全部帖子
回复 单个核细胞 的帖子
0 d( S! [4 j, R  G/ v# L! S
3 I! V; g" F8 x5 N6 B% ?" ~) n我的细胞基本上没有长成成纤维样的,但是瓶底用FBS铺了,确实是从贴壁9小时添加培养液时就有细胞爬出来,组织块贴壁不紧,常在第一次添加液体时就已经漂了,3-5天后换液细胞状态还可以,再过1、2天,细胞就碎了。是不是组织块贴壁不紧。
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