大鼠脂肪干细胞长期培养自发恶变

chichao0000

我课题组在长期培养脂肪干细胞过程中发现两株类似肿瘤细胞的细胞系，不知各位是否也发现过类似问题，干细胞在长期的体外培养过程中可能会自发恶变（原因可能为肿瘤细胞交叉污染或者基因突变），请大家讨论，附件1为一篇报道自发恶变现象的文章，但是后来撤稿原因是考虑交叉污染，附件2为细胞系交叉污染的分析报告文献。国内也有报道改变某些培养条件可以导致自发恶变现象的发生。

chichao0000

补充一下，我们是在经过大约半年的传代培养发现这一现象的，最明显的是倍增时间明显缩短，且聚集成堆，细胞变小，形态均一。

chichao0000

我们的干细胞论坛中还没有对此现象的讨论，希望大家多提建设性意见，例如：如何证明不是交叉污染（我课题组发生交叉污染可能性应该为零，因为我们实验室根本没有存放过肿瘤细胞系）；除了核型分析外还应该查哪些基因可以明确是自发突变（简单可行，价格合理的）；裸鼠肿瘤转移试验？（我没有买裸鼠但是在免疫正常大鼠皮下注射后形成结节，不知能否证明其恶性？）

chichao0000

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  这是10倍镜照片，大家有什么看法？

chichao0000

我上传了照片，但是怎么看不到呢？如何上传照片？

细胞海洋

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chichao0000

p43  照片

bin

不一定是交叉污染造成的，我更倾向于认为是基因突变。我记得去年在《自然》杂志上看过这样一篇文章，主要是讲干细胞长期培养会有致瘤的倾向，可能原因是自然选择造成的，因为突变后的细胞增殖速度更快，经过长期培养的话，在竞争中将占据更大的优势，经过长时间培养，增殖速度较慢的正常干细胞将会增殖速度较快的致瘤性干细胞取代。另外2011年《age》杂志上也刊登了中科院北京生殖研究所的一篇文章，BMSC在培养4代以后其致瘤性显著升高，而且随着培养代数的增加，致瘤性也是增加的，经过核型分析发现很多细胞的染色体就已经发生改变了。我们一直认为干细胞是一种万能细胞，其实真正将干细胞移植入体内，不确定性还是很大的，在以后的应用上我们一定要慎重。

bin

回复 chichao0000 的帖子9 z" Y% Q! b; s7 k6 f2 X! b8 P4 [' c

& t/ \0 ]! Z. f9 P! U, t5 |致瘤后的细胞增殖能力很强的，可以考虑挑选单克隆试一试，因为我们实验室就有人挑取一个BMSC的单克隆，现在已经传了好几百代了，其性能特征很像肿瘤细胞。

chichao0000

所以从这个角度讲，应用干细胞治疗时还是低代数较好。