无血清培养肿瘤干细胞，细胞很容易aggregation，请问怎样处理

wy200616

回复 qq348940434 的帖子! ~: O* f% v5 s
" Z- f, A4 Q1 b7 d7 x/ M7 f
上面漂了一层可能是死细胞碎片

wy200616

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4 |; |2 q  q- M, I0 x7 t2 X
6 U, W" k$ G8 v" G8 a$ ^谢谢你了！我因为需要大量细胞做其他实验，所以细胞浓度太大，因为怕聚集，所以摇晃很厉害，结果适得其反啊！/ I) B3 C" }+ L1 |8 Z( y

wy200616

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8 M7 w, J3 x  n4 v
* r9 f) a/ d  B1 z我用的是3814培养瓶

qq348940434

回复 xiaolong 的帖子4 d! J; R3 }/ _

, ^+ ]# i: l8 b8 M( I) X% ?不是。我现在养出来第二天就感觉是培养基变浑浊了的样子。

xiaolong

悬浮生长，能看到聚团的，很正常，就像单个微生物培养后生成菌落一样一样的

qq348940434

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! u: R, {$ L9 n3 o( D( w; m6 _. a6 p
请教个问题，为啥我按你所说的第三种方法 里面直接加入无血清培养基（生长因子），然后过了1天，现在看起来都是浑浊的。

qq348940434

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: @7 k8 p4 p7 Q2 B: N/ g& w; v, o5 s: i" X1 u9 z
没，这种绝对不是细胞污染的样子，应该是细胞浓度的问题，还有可能就是我生长因子的浓度高了，我是EGF和bFGF都是40ng/ml的浓度。

mike19840320

是细胞密度太大的问题，可以在96孔板中，使没孔1个或2个细胞，这样就不会发生细胞聚集。

570505

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" [9 B5 K$ u# Q+ O( M: J2 i$ V" r/ n- k
; _# V. O& n4 }. |那应该是细胞有污染了

qq348940434

回复 570505 的帖子& U8 i2 L- t  k8 D* g, \. w

) a6 X3 N& U& m3 a你所说的先贴壁培养，再用干细胞培养基养，我上学期也有试过，但是不知道为啥，也没养出来，养了5天左右就看见一瓶子的膜一样的东西飘着。。。