无血清培养肿瘤干细胞，细胞很容易aggregation，请问怎样处理

wy200616

回复 qq348940434 的帖子7 N' ?: v  X2 a7 y0 `/ G

' U# ~9 Q1 t: ?上面漂了一层可能是死细胞碎片

wy200616

回复 570505 的帖子
7 C& ]& r; e( R& A5 O" e, W( [' N2 e! h% F% E. e  o( B3 l! j
谢谢你了！我因为需要大量细胞做其他实验，所以细胞浓度太大，因为怕聚集，所以摇晃很厉害，结果适得其反啊！
4 g; B9 V  n7 @8 I5 C6 R/ V

wy200616

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# G0 N  Q% Q- w# |我用的是3814培养瓶

qq348940434

回复 xiaolong 的帖子0 k# ^* J* v4 E/ `: a9 t9 f' a
+ ?. |1 i3 S! _9 t
不是。我现在养出来第二天就感觉是培养基变浑浊了的样子。

xiaolong

悬浮生长，能看到聚团的，很正常，就像单个微生物培养后生成菌落一样一样的

qq348940434

回复 570505 的帖子) E. }. R; O4 U# [! D

0 q9 x& y! i$ m5 [请教个问题，为啥我按你所说的第三种方法 里面直接加入无血清培养基（生长因子），然后过了1天，现在看起来都是浑浊的。

qq348940434

回复 570505 的帖子$ N/ O  m6 U; E- A5 [" p8 x
$ p# h) ?  H. y1 |' z+ @
没，这种绝对不是细胞污染的样子，应该是细胞浓度的问题，还有可能就是我生长因子的浓度高了，我是EGF和bFGF都是40ng/ml的浓度。

mike19840320

是细胞密度太大的问题，可以在96孔板中，使没孔1个或2个细胞，这样就不会发生细胞聚集。

570505

回复 qq348940434 的帖子) q4 J5 ~" M& {4 {& Q
+ B& |# j7 Z: u1 M# {% w
那应该是细胞有污染了

qq348940434

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) d' c' p5 ]6 E; i6 t, T/ l. e% H$ e" \1 X" M0 _6 l4 s
你所说的先贴壁培养，再用干细胞培养基养，我上学期也有试过，但是不知道为啥，也没养出来，养了5天左右就看见一瓶子的膜一样的东西飘着。。。