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请问干细胞的悬浮培养知怎么做的? [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-4-23 11:29 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近在做ips的诱导的分化实验,遇上了一个最基础的问题,就是再诱导分花前不知道该怎么让它们悬浮培养?请高手指点一下
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专家 优秀会员 金话筒

沙发
发表于 2013-4-23 17:25 |只看该作者
放置摇床在培养箱,缓慢摇动培养皿,不让细胞贴壁,ES或iPS细胞会形成EB(embryonic body),也是ES细胞在体外检测分化能力的经典方法之一。
- q" d+ D! }( ~6 F2 \. j9 S8 \5 Q  i4 w0 W& v
补充内容 (2013-4-23 17:26):
! J4 t7 F" X* r; N+ Z2 d培养液少加血清,不加LIF
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藤椅
发表于 2013-4-24 15:43 |只看该作者
细胞培养皿中有悬浮培养皿,你买那种培养皿,将细胞消化分散后接到里面,一般很快就会成为类配体了。
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金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2013-4-24 16:26 |只看该作者
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可以用细菌培养皿,有条件的话可购买专门用于悬浮培养的超低吸附培养板。
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报纸
发表于 2013-4-25 14:55 |只看该作者
{:2_31:}谢谢大家+ V0 h) P3 M- n$ _

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地板
发表于 2013-4-25 15:04 |只看该作者
{:2_31:}谢谢大家
7 Y$ M+ B% J4 Z6 O# i1 y

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发表于 2013-4-25 15:08 |只看该作者
我还看到有人建议用agar胶包被培养皿,也可以使细胞不贴壁。
% S' `& u7 v& P8 _) }2 b+ `大家有人知道这种方法吗?
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小小研究员

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发表于 2013-4-26 23:17 |只看该作者
回复 fwj81 的帖子
- {% N- Y/ f. `# {( e* v0 N
  C) i# T7 p9 P. i1 k你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
1 s2 C; X0 s+ m" ~' I/ |: r) U( p/ S
4 l- Q" A% z. B否则他会看不到

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发表于 2013-4-27 16:12 |只看该作者
不加血清不加LIF就好了
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发表于 2013-5-8 14:45 |只看该作者
前几天用0.5%的琼脂糖高压灭菌后铺6cm板,方法同明胶铺板,然后再进行ips细胞的悬浮培养,发现效果很好,一个细胞都没贴。这两天都可以观察到一个个悬浮的小克隆,貌似已经形成EB了。
8 b# |" \9 Z# S- j9 d
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