请问干细胞的悬浮培养知怎么做的？

fwj81

最近在做ips的诱导的分化实验，遇上了一个最基础的问题，就是再诱导分花前不知道该怎么让它们悬浮培养？请高手指点一下

username

放置摇床在培养箱，缓慢摇动培养皿，不让细胞贴壁，ES或iPS细胞会形成EB（embryonic body），也是ES细胞在体外检测分化能力的经典方法之一。/ M8 }" n9 G5 ~$ \5 G( \/ x

8 J6 Q% z; O# k% {/ i9 k) b; E补充内容 (2013-4-23 17:26):2 d* V0 d' S; j) Z  A' U: \# e: m
培养液少加血清，不加LIF

褚cell

细胞培养皿中有悬浮培养皿，你买那种培养皿，将细胞消化分散后接到里面，一般很快就会成为类配体了。

dilal

可以用细菌培养皿，有条件的话可购买专门用于悬浮培养的超低吸附培养板。

fwj81

{:2_31:}谢谢大家
: a/ Z. W. F( T7 ^: n

fwj81

{:2_31:}谢谢大家
! r% a* u- v+ b* o7 ]

fwj81

我还看到有人建议用agar胶包被培养皿，也可以使细胞不贴壁。7 b0 \4 O* t% T
大家有人知道这种方法吗？

细胞海洋

回复 fwj81 的帖子6 X6 J& c& a! q$ s

4 t* k8 T, |. k. M. s4 Q" P你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样- Y4 d# G, y7 P$ d- _- s  Q+ q
- I) L# H! S3 E; m  j: R$ \
否则他会看不到

雪国叶子

不加血清不加LIF就好了

fwj81

前几天用0.5%的琼脂糖高压灭菌后铺6cm板，方法同明胶铺板，然后再进行ips细胞的悬浮培养，发现效果很好，一个细胞都没贴。这两天都可以观察到一个个悬浮的小克隆，貌似已经形成EB了。* x2 y( l& u. b7 W1 ~