请问干细胞的悬浮培养知怎么做的？

fwj81

最近在做ips的诱导的分化实验，遇上了一个最基础的问题，就是再诱导分花前不知道该怎么让它们悬浮培养？请高手指点一下

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放置摇床在培养箱，缓慢摇动培养皿，不让细胞贴壁，ES或iPS细胞会形成EB（embryonic body），也是ES细胞在体外检测分化能力的经典方法之一。2 t* i" h& D0 i. t

5 P' F! ~, `8 t5 o* l  X* s补充内容 (2013-4-23 17:26):6 t5 i5 f3 B9 h$ W" X" \
培养液少加血清，不加LIF

褚cell

细胞培养皿中有悬浮培养皿，你买那种培养皿，将细胞消化分散后接到里面，一般很快就会成为类配体了。

dilal

可以用细菌培养皿，有条件的话可购买专门用于悬浮培养的超低吸附培养板。

fwj81

{:2_31:}谢谢大家8 i& L. w4 ^9 A% G1 S; f6 ^! ], N

fwj81

{:2_31:}谢谢大家! {! C" I0 d3 {$ y/ B* N

fwj81

我还看到有人建议用agar胶包被培养皿，也可以使细胞不贴壁。
5 V+ O$ R6 N6 P  P% ?大家有人知道这种方法吗？

细胞海洋

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8 t# @5 t9 b% @7 d, ^" T, g9 A; `/ Y; R# g2 g
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( o5 h) g. \) E# T& ~2 f
否则他会看不到

雪国叶子

不加血清不加LIF就好了

fwj81

前几天用0.5%的琼脂糖高压灭菌后铺6cm板，方法同明胶铺板，然后再进行ips细胞的悬浮培养，发现效果很好，一个细胞都没贴。这两天都可以观察到一个个悬浮的小克隆，貌似已经形成EB了。0 r0 A1 q% B) z2 k9 ]9 m8 U: d