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多聚赖氨酸玻片如何处理?
. ~8 {5 G& i, v9 B+ E# [ 多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:! d" A/ D! u ~
) o( H4 t- Y% C) o (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。
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(2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。/ S6 Y9 K3 F \& G3 R
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(3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。; J n! {) }8 O R; A3 U+ Z
' h# w1 h3 Z8 K% B (4)取出后放在无尘的地方晾干。
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' o/ y) Q8 o5 R( n/ s (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。# ^ @/ J% x6 Y+ H
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(6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。; ~5 B2 ^6 ~; N$ u, A& _( e
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(7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。' ?4 A, ~# u# B! L
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固定的原理:
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细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。 |
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