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急请教防脱玻片 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-4-24 13:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-24 13:09 编辑
. w/ }4 U# |4 |& H9 X$ G8 }& ]- s* q* U9 y+ J) O
请问防脱玻片用于细胞培养的,要用经过多聚赖氨酸及APES都处理过的吗?用于人脐带间充质干细胞诱导分化培养的
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沙发
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
8 ?7 r6 @# M. [% q7 F
多聚赖氨酸玻片如何处理?
. ~8 {5 G& i, v9 B+ E# [          多聚赖氨酸玻片的处理方法及细胞的固定方法:! d" A/ D! u  ~

) o( H4 t- Y% C) o        (1)把玻片清洗干净,最好用酸清洗一次,然后用蒸馏水多次冲洗,去除玻片表面所有的杂质。
# z. p/ M$ v6 f/ U& _1 z( \7 p8 Q* Z7 j& C1 ~% |: }
        (2)把清洗干净的薄片放入烘箱中160℃烘干(2-3h)。/ S6 Y9 K3 F  \& G3 R
' `5 b! m. X& h
        (3)烘干的玻片放入一定浓度的多聚赖氨酸(浓度可参考文献)溶液中浸泡5-10min。; J  n! {) }8 O  R; A3 U+ Z

' h# w1 h3 Z8 K% B        (4)取出后放在无尘的地方晾干。
( P4 `- ]2 X( M# m6 e0 ?" {
' o/ y) Q8 o5 R( n/ s        (5)晾干后的玻片放入密闭的盒子中在4℃冰箱中保存,可以使用2个月。# ^  @/ J% x6 Y+ H
2 Z% Y$ E: x2 w4 M2 j; l8 B
        (6)吸入100-200μL的悬浮细胞液,加入多聚赖氨酸处理的玻片上,轻轻摇动,使溶液分散到玻片上,等待3-5min后加入测试液。; ~5 B2 ^6 ~; N$ u, A& _( e
/ f' J; [; Q, }2 |
        (7)在显微镜下观察细胞是否已经固定。' ?4 A, ~# u# B! L
1 M6 Q% G; d$ Q. D

/ W& E' T, T1 V4 |+ f7 F- l& |; {' p; }( a' R6 n4 l3 W, v
        固定的原理:
3 {& }3 j: {' m# X1 @+ A$ _7 k. `7 n2 T  `3 D% e
        细胞表面带负电荷,多聚赖氨酸带正电荷,因此只要浓度合适,细胞就可以很好地粘附都多聚赖氨酸上。
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藤椅
发表于 2013-4-24 15:41 |只看该作者
整个处理过程注意无菌

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板凳
发表于 2013-4-24 16:55 |只看该作者
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wf78365421 你说的是免疫组化的吧?楼主要的是细胞培养所使用的方法。
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报纸
发表于 2013-4-25 08:47 |只看该作者
本帖最后由 湖南干细胞 于 2013-4-25 08:49 编辑
) F3 i3 [% Q/ n( r' g8 F* {' L7 }% k! S2 z
回复 wf78365421 的帖子9 Y7 _/ ~3 M& H( |$ |" k- G

! G; [3 `4 l. A2 J+ h谢谢,我想买防脱玻片用于细胞培养,不知道买经过那种处理的玻片好,有没有推荐的货号和品牌?

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小小研究员

地板
发表于 2013-4-26 23:54 |只看该作者
回复 aminhair 的帖子' a0 K6 H: z/ H* z% \

1 a$ K4 b8 u8 T你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
$ l" l( R0 H, P- f0 x( k. U7 \; U& a, u4 v
否则他会看不到

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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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发表于 2013-4-30 22:56 |只看该作者
直接6孔板养不就好了
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