干细胞污染

mayiwaiwai

. |/ w0 D* D% q8 }, w刚复苏的ES，可以看见这样的死细胞，被细菌侵蚀的，变成空壳，微小的点是可以动的，还会看见细长透明状的，也会动，附着在细胞上，分布在培养基，冻存前细胞是好的，留有一盘继续培养了一段时间，也就是说，要么DMSO污染掉了。要么是冻存管用的时候污染了，另外冻的细胞也会看见这种情况，想请教两个问题：DMSO能被污染吗？有没有同学也遇见这样的污染，像这种细菌在皿和皿之间传染么？

qq007www

你这个真不像污染了，应该是死细胞太多了而已

琳茗

个人觉得你应该等他贴壁后看细胞状态，如果仍觉得是污染我觉得有几点可能导致：1.此次培液所用的FBS是否有被污染  2.培养箱是否被污染，一般情况是应该定期清理  3. 就是你冻存液没配好，导致你复苏时细胞早已死亡。 个人意见哦  我们曾今遇到过污染的 不过是贴壁后 发现有微小的点是可以动的这种状态。

iytbxxg

过期的DMSO应该不能用了吧，要不人地就不会给你个保质期了，复苏时在水浴锅时快融时刚好看到没有冰块就要拿出来，并马上进行去DMSO操作，望指教

iytbxxg

从图片上看我都看不出有污染的样子，按你说的应该是冻存和复苏出了问题了。DMSO是绝对不可能有菌的，能在DMSO中生长的生物目前应该还没发现吧，如果复苏出来就发现污染，哪就是冻存前就污染了，DMSO冻存时候保护细胞更保护细菌，你应该冻存前的时候就会发现了。冻存管要是有问题也不会刚复苏就可以看到了吧（相信细菌不是很多）。要是（复苏一只别人实验室的细胞株，结果也是这个样子，传一代就不行了）话，相信是冻存和复苏出问题了，有没有遵守慢冻快融的原则，加入DMSO后有没有放在高于4度的条件下太久了，望指教

mayiwaiwai

回复 yongchen1314 的帖子* f9 m" o- U3 v+ S
. a( t! @/ I1 q! v0 b/ O$ m
请问高手怎么解决的呢？复苏一只别人实验室的细胞株，结果也是这个样子，，传一代就不行了，该注意的地方都注意了的，那些东西又会出现，贴壁不好，长得慢，也去除不掉，差不多12小时换液的，

mayiwaiwai

回复 前途似锦 的帖子5 S$ R7 y* s) t6 n% h, v

. r. q. ]/ S" d. y; R; _冻死了？过期的DMSO有问题么？

前途似锦

这明显是细胞冻死了，换一株吧

mayiwaiwai

回复 kjeldahl 的帖子$ @- i4 P' I7 E1 {, p3 ]$ c

# D( r, V5 b, _; Y* ^0 N& }& c这是40x的呢，对我们的镜子是最高倍了呢，还没贴壁就这样的，复苏后直接观察的。水浴锅是没有问题的

kjeldahl

没有高倍镜的么？贴个高倍的明场的，你这细胞没帖就这样了么？水浴锅干净不。