关于二抗IgG、IgM的选择，请问要分亚型吗

请叫我晓白

请问如果一抗是小鼠抗大鼠IgM，是否二抗必须选择抗小鼠IgM的二抗？0 c5 o9 ~+ H$ W% z$ E, F$ L
如果一抗是小鼠抗大鼠IgG1，那二抗需要选择针对IgG1的二抗还是只需要选择抗小鼠IgG就可以了?
1 g: E( n# J  i( y有的一抗表明了抗体的亚型，比如IgM、或者IgG1、2等
" I2 n0 B8 M6 x; ]0 U7 Q. J% e请问这对选择二抗有什么影响

sun_happone

我也想知道，求高手~~~

xiangyu83

8 F' s' T8 n8 @; z
第一个问题： 是的。二抗必须指向一抗同型。6 }1 P6 I# x4 _3 W& z- ]; D5 v
第二个问题：一般实验不必区分亚型。IgG类的二抗是通用二抗，可以和各个不同亚型IgG结合。
' ^" U, q6 ^5 g! {以下是一些常识（copy）:. @( m% e4 u" k1 p4 _
二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体.
0 P2 J+ K$ v/ V单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品列表中列出，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM，或是抗小鼠IgG抗体。5 F8 j/ n; E; M! p( A* Y  U2 E
如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。
! B* J2 W1 {: r" T& }如果你不知道一抗是哪一类别或亚类，那么抗小鼠IgG是一个不错的选择，因为此种抗体可以识别大多数类型的IgG免疫球蛋白。

请叫我晓白

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多谢指导。请问一般来说IgG和IgM哪种抗体效果好一点呢？据说IgG效果更好是吗

xiangyu83

目前绝大多数一抗都是IgG，比较成熟。个人意见，不是实验必须需要，选择IgG的一抗即可。

chutu

2 D! e; U6 |! t& Q

/ W  C/ U# K; s回复 请叫我晓白 的帖子
* k* n7 H! i) g0 T
) p4 U; e* i; O! R( q# D. Z好像楼主开始就把一抗、二抗搞反了。一抗是against某个特定抗原的，一般是单抗，单抗才有分型的说法，多抗里什么类型都有。单抗多数是小鼠来源的，也有大鼠和兔源的。二抗是against一抗免疫球蛋白上的抗原决定簇的，各抗体亚类包含不同的抗原决定簇，所以如果二抗选择单抗，就必须是抗一抗的那种亚类的。但是二抗一般用多克隆抗体血清，因为可以通用，不用管一抗所属的亚类，只要知道哪种动物来源的那类抗体，IgG还是IgM，多克隆抗体血清都有效，可以把其上偶联的荧光分子或显色酶等结合上去

请叫我晓白

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+ D! x9 h3 Z1 Q' j& S
; q: s; H( r6 q6 i0 d  V# O我目前做荧光双标，必须要小鼠来源的一抗，但搜来搜去就只发现这一种，但是是IgG。不知道染色效果怎么样啊

xiangyu83

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) _7 c7 l3 V/ Z
2 Y& h5 L( A% ^* J不清楚为什么必须用小鼠来源一抗，你的组织或细胞是什么来源的？

请叫我晓白

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大鼠组织。因为我做双标已经买了一种兔来源的一抗了，另外一种只有小鼠的了啊! m6 t: o9 w# N( u1 q
其他来源的貌似很少啊。有什么办法克服吗？

xiangchou812

还是看一下地板层的回复吧，感觉楼主还是没把一抗二抗搞清楚。一抗是靶向所要研究的组织中的目标抗原的，二抗才是带有荧光标记、与一抗结合的。