关于二抗IgG、IgM的选择，请问要分亚型吗

请叫我晓白

请问如果一抗是小鼠抗大鼠IgM，是否二抗必须选择抗小鼠IgM的二抗？
5 d& y# H; W& V$ ~/ Y如果一抗是小鼠抗大鼠IgG1，那二抗需要选择针对IgG1的二抗还是只需要选择抗小鼠IgG就可以了?3 ]) s& }4 m$ F2 B5 J' }5 v" n
有的一抗表明了抗体的亚型，比如IgM、或者IgG1、2等7 @6 F5 W  q5 M' D! i8 G
请问这对选择二抗有什么影响

sun_happone

我也想知道，求高手~~~

xiangyu83

! D/ N+ j+ y) j8 p/ A4 n& T
第一个问题： 是的。二抗必须指向一抗同型。
0 s' \) ]2 v6 h, u- y$ _- Q; K第二个问题：一般实验不必区分亚型。IgG类的二抗是通用二抗，可以和各个不同亚型IgG结合。
6 ]9 ~/ ?9 ^6 O2 y& v9 }8 C以下是一些常识（copy）:
' W" e" k5 M- v6 M二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体.$ L& a" \: T9 F: H3 A5 _* }
单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品列表中列出，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM，或是抗小鼠IgG抗体。
$ I# w; _& w) i6 o3 V) H) h如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。
4 Y. N3 O! v1 ~2 u! h( ^' w如果你不知道一抗是哪一类别或亚类，那么抗小鼠IgG是一个不错的选择，因为此种抗体可以识别大多数类型的IgG免疫球蛋白。

请叫我晓白

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  b; j8 a* V7 Z% o5 b, {2 o多谢指导。请问一般来说IgG和IgM哪种抗体效果好一点呢？据说IgG效果更好是吗

xiangyu83

目前绝大多数一抗都是IgG，比较成熟。个人意见，不是实验必须需要，选择IgG的一抗即可。

chutu

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6 ?" Y/ T# B' b0 [' ?回复 请叫我晓白 的帖子" S/ [: O9 u. u; u* `
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好像楼主开始就把一抗、二抗搞反了。一抗是against某个特定抗原的，一般是单抗，单抗才有分型的说法，多抗里什么类型都有。单抗多数是小鼠来源的，也有大鼠和兔源的。二抗是against一抗免疫球蛋白上的抗原决定簇的，各抗体亚类包含不同的抗原决定簇，所以如果二抗选择单抗，就必须是抗一抗的那种亚类的。但是二抗一般用多克隆抗体血清，因为可以通用，不用管一抗所属的亚类，只要知道哪种动物来源的那类抗体，IgG还是IgM，多克隆抗体血清都有效，可以把其上偶联的荧光分子或显色酶等结合上去

请叫我晓白

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我目前做荧光双标，必须要小鼠来源的一抗，但搜来搜去就只发现这一种，但是是IgG。不知道染色效果怎么样啊

xiangyu83

回复 请叫我晓白 的帖子1 U) j- x6 P% ^! Z

! Q5 R. C0 l: M& F- z; Z0 j$ [不清楚为什么必须用小鼠来源一抗，你的组织或细胞是什么来源的？

请叫我晓白

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大鼠组织。因为我做双标已经买了一种兔来源的一抗了，另外一种只有小鼠的了啊4 a! p1 i# Z9 T8 Y8 b" H2 P8 p
其他来源的貌似很少啊。有什么办法克服吗？

xiangchou812

还是看一下地板层的回复吧，感觉楼主还是没把一抗二抗搞清楚。一抗是靶向所要研究的组织中的目标抗原的，二抗才是带有荧光标记、与一抗结合的。