神经干细胞培养包被物的选择

changbo529

各位前辈您们好：小弟想请教下三种包被物多聚赖氨酸、层粘连蛋白和纤连蛋白对神经干细胞培养的影响。请多多指教，不胜感激，谢谢

Life_Tech

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( z! Q* l( w" z) A, q  o) Z我们推荐纤连蛋白或CELLstart™ CTS™配制基质，可参考该链接中的实验方案lifetechnologies.com/neuroprotocol/hnsc
+ N- w& X5 f' _9 i2 u完整的实验方案已汉化，稍后分享给大家
" ]7 E8 }3 m4 N2 E: K+ Q
1 ^6 D* g" x4 M# M采用CELLstart™ CTS™包被培养器皿  R- [0 X3 o1 W7 L
1. 用含有钙和镁的D-PBS以1:100稀释CELLstart™ CTS™ (如，50 μL的CELLstart™# M7 w& u' x9 p: B4 d
CTS™稀释至5 mL的D-PBS中) 。
3 y% W5 @8 X/ t9 m" b' J5 n0 e: K注：CELLstart™ CTS™ 不得冷冻、涡旋振荡或剧烈搅拌，否则可能形成凝胶。. Z" u. _# c9 C2 h! b) \6 \! n  y
2. 用CELLstart™ CTS™工作液包被培养器皿的表面 (T-75：14 mL，T-25：7 mL，60-mm
+ W  P( n- r& ]" @培养皿：3.5 mL，35-mm培养皿：2 mL) 。
4 P1 y& D, p' D: `5 J3. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中孵育1小时。
" \2 y3 u; r% |4. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除所有CELLstart™ CTS™溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。
$ b; R9 _" |+ Z4 i注：您可以提前包被培养板，置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2周。直至使用前，切勿去除CELLstart™ CTS™溶液。确保培养板不变干。- z3 D3 E  Z& C2 ^
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采用纤连蛋白包被培养器皿
# }9 v" n+ g; L- s+ F& V1. 用蒸馏水稀释纤连蛋白，配制成1mg/mL的储存溶液。; S1 j5 z7 [/ q8 _
2. 将工作液置于-20°C下保存待用。' l9 E- e2 \1 w; v
3. 将储存溶液加入D-PBS中，配制20 μg/mL的工作液。
6 y: N. l$ _" J4. 加入足量的工作液，覆盖培养器皿的表面 (T-75: 10 mL，60-mm培养皿: 2.5 mL，35-  p+ b$ d0 @4 Y4 n$ M8 e
mm培养皿: 1.5 mL) 。
: Q# U5 v5 o/ F, S5. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中培养1小时。
: e$ j) `# n% K; l% U- O$ ]+ i6. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除纤连蛋白溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。
# c( x8 _2 |" z9 ?注：您可以将纤连蛋白处理的培养板置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2 周。确保培养板不变干。无需清洗步骤，吸取多余液体后可直接使用培养皿。

changbo529

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8 G; q  ]0 m* t' P/ h6 m- m
非常感谢老师细心的指导

Life_Tech

回复 changbo529 的帖子: W# D1 ~& l: H  J
" u+ L  W+ A& N3 N+ X
我们现在可以提供中文版神经生物学研究的17个实验方案了，欢迎来申领哦。见以下链接中的帖子。+ I/ K& Z3 W0 P( Z  T4 i
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http://www.stemcell8.cn/thread-72983-1-1.html