神经干细胞培养包被物的选择

changbo529

各位前辈您们好：小弟想请教下三种包被物多聚赖氨酸、层粘连蛋白和纤连蛋白对神经干细胞培养的影响。请多多指教，不胜感激，谢谢

Life_Tech

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我们推荐纤连蛋白或CELLstart™ CTS™配制基质，可参考该链接中的实验方案lifetechnologies.com/neuroprotocol/hnsc' S  G" j- l3 f/ j& z+ O& l- D
完整的实验方案已汉化，稍后分享给大家
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$ r" ^: [) J+ I2 h0 U$ @! s采用CELLstart™ CTS™包被培养器皿
/ i; o+ m/ s4 k: r3 F0 B1. 用含有钙和镁的D-PBS以1:100稀释CELLstart™ CTS™ (如，50 μL的CELLstart™% i% i& w, Q/ Z: j/ }
CTS™稀释至5 mL的D-PBS中) 。
% B7 E- G6 |8 ?; o, H6 A* s注：CELLstart™ CTS™ 不得冷冻、涡旋振荡或剧烈搅拌，否则可能形成凝胶。
- C' _" O* v  Q4 l! z9 h/ u2. 用CELLstart™ CTS™工作液包被培养器皿的表面 (T-75：14 mL，T-25：7 mL，60-mm
  @& [8 F$ {/ S( |5 e4 w& B9 Z培养皿：3.5 mL，35-mm培养皿：2 mL) 。
- I/ u; B% ]; ?4 v8 }' @3. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中孵育1小时。# e1 m0 Y  _! t$ b3 Z
4. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除所有CELLstart™ CTS™溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。' X( V7 l4 h0 v$ q4 I
注：您可以提前包被培养板，置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2周。直至使用前，切勿去除CELLstart™ CTS™溶液。确保培养板不变干。
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采用纤连蛋白包被培养器皿4 f) r6 C9 Z; @
1. 用蒸馏水稀释纤连蛋白，配制成1mg/mL的储存溶液。9 H8 D5 ?. k! R2 W" g9 X) v
2. 将工作液置于-20°C下保存待用。
( y5 N0 h" a( o" f' p; n$ F  M6 [3. 将储存溶液加入D-PBS中，配制20 μg/mL的工作液。
/ H: }% ^. d0 l3 q2 d" y4. 加入足量的工作液，覆盖培养器皿的表面 (T-75: 10 mL，60-mm培养皿: 2.5 mL，35-- t% H  N: z$ J5 K7 m6 U
mm培养皿: 1.5 mL) 。% E9 {* C9 _3 ?) J
5. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中培养1小时。" c5 e& i4 `) r, N* d
6. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除纤连蛋白溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。
) L! a! q0 X8 v1 h2 V0 ~7 H; ]. f注：您可以将纤连蛋白处理的培养板置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2 周。确保培养板不变干。无需清洗步骤，吸取多余液体后可直接使用培养皿。

changbo529

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非常感谢老师细心的指导

Life_Tech

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) f- s. ?% A& `+ S. A& s
我们现在可以提供中文版神经生物学研究的17个实验方案了，欢迎来申领哦。见以下链接中的帖子。5 O" q7 ~4 T1 D. }9 G0 |

( I) M, E0 d7 e! c9 zhttp://www.stemcell8.cn/thread-72983-1-1.html