每10ml血你能提多少PBMC

easternliu

我一般40ml血提1.5-3.7*10^7的PBMC，听说别人每10ml能提1*10^7，大家一般能提多少哇

fengxiwu

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/ v8 F& ^) ~: C( C3 P     我做的是白血病实验，需要分离骨髓单个核细胞（BMNC)，梯度离心进行了不下20次。
2 Q2 V+ b3 d# Z5 @6 P8 ]! m    非白血病人的骨髓1-2ml分离的BMNC不超过10*7，而白血病人的骨髓1-2ml最多可以分离10*8到10*9 BMNC，治疗后的分离细胞数量同非白血病人样本.* W4 ^" S) N7 P5 B/ t4 J+ R3 e
      外周血的梯度离心也做过几次，7ml血液大都分离MNC 3-5×10*6左右。（非白血病）
6 T  Y! C8 y6 B! Y    外周血同骨髓相比MNC密度几乎差一个数量级。7 O2 ]5 d3 }$ b' q! P4 x
   

meister

一般1*10，6次方/ml

meister

一直很少的话，是分离方法有问题。偶尔少是样本的问题。

easternliu

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- h5 c, m/ D% o% Q0 K  ~: d  b; }
做了不少了，一直没这么大的量分离出来，10^6/ml这个量只有才做过一次脐血时接近。求教，分离哪些不易注意的细节，感激不尽

fengxiwu

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. {+ h: D! u% w% D5 b: {* u$ l- d5 g$ v' |5 ^& }
样本可能有个体差异，因为血液中的细胞比例是动态变化的，分离的单个核细胞包括了单核细胞和淋巴细胞，也只能是分离到其中的一部分，回收率不可能达到100%，如果按50%算的话，你看你能分离多少，而且，分离之后的洗涤离心也是会损失一点的。

easternliu

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  W- S) [7 [- L8 T
1 }9 C8 h; t- g, v& |: x  }: l做得不多，所以有些细节还不是很清楚

xiaostou

ficoll对细胞数得到多少很关键，选进口的吧

fengxiwu

回复 xiaostou 的帖子% ^- h9 {* o4 T0 V$ x! g2 y) N7 _& f. p

/ Q9 x: I$ P4 q国产的物美价廉，淋巴细胞分离液没有什么高科技的东西吧，不就是个密度梯度离心吗，为什么一想到的试剂都是国外进口的呢。细胞因子，荧光抗体，国内的如果质量上不去，他怎么提高销量，本来就够便宜的了，如果不提高销售量，哪里来的利润？我们中国人都不支持自己的产品，还奢望他人 的支持吗？要让别人尊重我们，我们自己首先要尊重自己！

meister

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% x/ D/ x' c0 Q2 J回复 fengxiwu 的帖子$ @" X* J( T" h
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国产的我试过了， 不稳定，效果比进口的差不少。有时低40-50%