请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

lyj-0017

回复 spring1221 的帖子
$ U( A, ]5 b; Y5 |; h" w7 X0 E8 N* j7 }) S+ [; T1 h' [* M  x
非常感谢，经验之谈！
4 N1 f# d, s* [2 I我也觉得是细胞量过大的问题，白蛋白是加到哪里呢？清洗的PBS还是培养液中？其余的措施都按照你说的注意一下，再观察一下吧。9 ~4 m0 w) K+ l$ F2 x, O, F6 a
那么你们以后的培养过程中也还有这种情况出现吗？

lyj-0017

回复 lousia04306 的帖子9 e% A( a' f4 p  d% b
$ K% I( Q; i: P4 e7 }
我就是想知道细胞聚集的原因啊？可否有合理的解释呢？

lyj-0017

回复 spring1221 的帖子
6 e$ B; }" J- d+ n3 n7 W* Z( E; M: c, q+ J! b
你们是直接采集外周血分离MNC还是机采MNC呢？培养都是用培养瓶而不用培养袋吗？

lyj-0017

回复 sunny.yc 的帖子
0 n  s/ E9 f) S" [
4 w+ o1 G7 M/ X0 O实际上，在贴壁过程中就已经出现絮状物了，此时是没有添加细胞因子的。但是，有的细胞确实是在培养后出现絮状物的，可能还是不同人对相同细胞因子的耐受程度不一样吧，还需要多积累经验啊，多谢~

lyj-0017

回复 xu_shufen 的帖子
6 I' c4 u" g8 g8 }  ~+ V8 r
: j* r$ ]) y& u0 M- |嗯，我也认为是纤维蛋白类物质引起的，也可能是细胞量过大的原因，血小板的可能不大，因为分离MNC时都是先把白膜层上方大部分液体先吸掉的，血小板剩余量应该不多

lyj-0017

回复 daifenghao 的帖子
* Z4 g! o4 N: v6 p9 h* X
5 s' R3 ]5 s7 h% T) r7 w添加进去的应该用血清吧？血浆里面本身就含有大量纤维蛋白，加入血浆后出现絮状物应该在情理之中才对

lyj-0017

回复 1179240331 的帖子
$ l2 i7 e; |; Y- a' s7 T2 H. x
' I: e; h4 S" A: q我们现在也在注意血浆物质残留的问题了，分离MNC时也已经严格清洗了，观察一下看看吧。/ Q6 p7 W+ h# h# A2 b2 O- o
采血要是混合不均匀的话，凝血也会使得分离的MNC量减少吧。
" P* W# Z0 k0 m, ?你的意思他们分离出MNC后进行培养时出现细胞团块吗？

lyj-0017

回复 sunny.yc 的帖子
7 h6 e2 [0 m3 x* \' U  Y: G9 k- v. W: W: \# n3 C+ {
我们贴壁的时候只加培养基，没有同时添加血浆（加血浆还是血清？）。( u. x: ]3 e' L8 o) ?5 \
如果加点白蛋白会不会好点呢？

lyj-0017

回复 chenguangyu 的帖子
+ m. `+ N  j4 T* `" [0 U; ]/ `( v4 |1 n
最近细胞生长的状态如你所说，袋内白膜确实是逐渐自动散开了，并且细胞长势还不错。但是有时候，加液后，原本长得不错的细胞会聚团，像是细胞死掉了聚团？这是什么原因呢？

lyj-0017

回复 daifenghao 的帖子0 g# Q& n$ J0 f+ G9 |. L

, D. ]9 g, c1 v* c! P我现在发现，细胞铺袋后不要摇晃袋，让细胞自己调整，过几天白色丝膜就会自动消失，你们可以观察一下试试