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请教CIK培养过程中出现的絮状物问题!!!   [复制链接]

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楼主
发表于 2013-6-13 22:51 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
我们是采用血液分离机分离外周血单个核细胞,然后加入培养袋中诱导培养CIK,这种方式采集的单个核细胞量较大。4 M4 y9 |* p) D- o
我们在培养过程中发现,贴壁后的悬浮细胞转入培养袋中后第二日,或者加入培养袋后两三天后,在培养袋中会出现很多絮状物,我想问的是大家有没有遇到过这种情况呢?大家也帮忙分析一下原因吧,附图片见下。
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沙发
发表于 2013-6-14 13:34 |显示全部帖子
回复 easternliu 的帖子
' z- B8 H2 t$ I6 t* G# n0 t9 M2 q  t7 m4 j7 j' [
你们是直接采集外周血还是使用血液分离机呢?

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藤椅
发表于 2013-6-14 13:35 |显示全部帖子
回复 sunny.yc 的帖子& u) |! ^# n3 o; T/ d* n: h

9 T  p9 J+ V/ q1 Q( O- ]不好意思啊,照片拍的时候有点反光,像素也有点低

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板凳
发表于 2013-6-14 13:39 |显示全部帖子
回复 孙帅帅 的帖子& _0 t3 J$ u% H1 g3 e9 o' `- r
$ D2 S& c% u5 H. K3 P$ N% ^* F
请问你们是直接采集外周血分离MNC还是机采?1 {, Q% i3 c2 o  P1 U$ Y
肯定不是细菌感染,染菌我还是能看出来的。  H- G) @3 X7 ~5 ?
我们是有的细胞是克隆状,但有的就确实会出现絮状物,并且,同一个人的两个培养袋,一个出现絮状物,一个却是长得不错,不知道到底哪里出问题了
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报纸
发表于 2013-6-14 13:42 |显示全部帖子
回复 呼吸 的帖子$ a/ X) Y: A" {$ k# J& j

, N; h# K/ l% ~  v# \; r" Q使用分离机分离时,采集人员肯定都是按照采集MNC的设定流程操作,这个应该不会错吧。
. \% r8 m" G# |. X" @您指的杂细胞是指什么细胞呢,转袋过滤是要过滤掉什么成分呢?
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地板
发表于 2013-6-14 13:52 |显示全部帖子
回复 chenguangyu 的帖子
% W6 m, N9 x+ _2 B4 d( B) T0 J, G, F7 q, e7 i. X/ _$ l6 B. J
请问你们是用分离机采集MNC吗?
+ N+ c" q$ N* \' T6 `我感觉细胞转袋之后第二天看时,培养袋底部有一层膜状物质,用手轻按就会浮起来变成絮状,在显微镜下观察这些絮状物发现,絮状物都是细胞粘连在一起,这样对细胞后续培养会有什么影响呢?- [* q- O+ T' ~$ |& U9 H
到底为什么这些细胞会粘连在一起呢?还是因为细胞密度太大?抑或是转袋之前没有清洗干净血浆成分?
/ r! v  e6 `% D' I4 K$ w3 X
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7楼
发表于 2013-6-14 13:53 |显示全部帖子
回复 lizzy_81 的帖子% u8 F0 u/ K  _5 @9 O3 [6 w  f

2 `  f, G& D% n! b; d/ C嗯,也许有这个原因,以后制备时注意一下

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8楼
发表于 2013-6-14 13:55 |显示全部帖子
回复 sheepthief 的帖子* V0 O( s5 y$ ?6 V5 }, [2 `  n4 `

6 n! l& ]+ L8 }7 }; U: u是有的病人这样,有的不这样,并且,有的病人刚开始时还没有,但是培养几天之后才变成这样,您给帮忙分析一下

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9楼
发表于 2013-6-14 13:59 |显示全部帖子
回复 孙帅帅 的帖子
, O* j  a# b2 y8 K6 p) o$ i& c* |, p9 W& ]1 l4 D2 |7 J
是啊,我也很奇怪为什么会这样。5 S9 x+ \( m1 k8 l
我们是使用分离机采集MNC,而不是直接采血,你们是采集50-100ml外周血进行分离吧?
# u) A* T* i2 X9 H什么是一步法分离外周血MNC?

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10楼
发表于 2013-6-14 17:35 |显示全部帖子
回复 daifenghao 的帖子7 E7 \% u& n! k- P2 ]4 S, ]

2 q- v7 v8 ]( r% h没有添加血浆,我们不用血液离心完后的血浆的
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