请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

硕果累累_555

细胞图片不清晰，有可能是转袋没有拍散细胞聚集生长，但看着不像，还有一种可能是培养细胞所用器皿或者瓶袋的质量不好，有微量残留造成的。

lyj-0017

回复 daifenghao 的帖子" g6 I+ ?( A; g7 J

$ m# d5 h: Q: L& J9 |$ n6 C3 ^2 s% u2 Z没有添加血浆，我们不用血液离心完后的血浆的

lyj-0017

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' A1 {+ {- ]+ |0 N0 |
" K) c5 e2 ~4 z: R  ~会不会是我们分离白膜层之后，清洗细胞不够，导致残留的血浆也一同加入培养袋中了呢？

lyj-0017

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4 o/ U9 x2 a6 {% n# ^) V2 Z' _; M0 A5 ]% v3 G2 S+ K
我知道你说的这种操作，关键是你们是用50-100ml外周血分离MNC，我们是机采分离MNC，机采采集的MNC数量肯定比前者数量要多的多，这两种方式的培养情况肯定不一样的

lyj-0017

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3 {& O3 k$ Y$ j# B" l$ @8 D9 K2 X4 I
我们转袋之前都是把细胞吹散的，会不会是细胞密度太大的缘故呢？
  G$ x7 e7 Z* c3 I+ t/ n9 h" O另外，我们用的都是康宁的瓶子，TAKARA的袋子，质量应该没问题吧

sunny.yc

回复 sunny.yc 的帖子; N/ z8 x; f2 i2 w0 m( t9 S/ A# V

; \3 ]/ p% t; }. C我们之前也遇到过这个情况，当时是在包被过的培养瓶中，聚团非常大，而且瓶中的散落的细胞几乎没多少了，细胞碎片也比较多，吹打开也没用，过段时间还会重新聚集。7 M  s  I$ G6 P% n* \' E
这种情况也咨询过别人，得到的一种答案我觉得还比较靠谱，就是，细胞形成集落了，但我感觉还是细胞受刺激过度。
, h% b4 T& B! \2 k$ g9 g7 m* a是不是你的细胞因子浓度太高导致的呢？

1179240331

1 k# H6 t4 v8 Z# S" G& ]! R! |8 v& T" J
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1 d8 Z& h8 b! r1 T, a" V; e0 [! V' H( w/ n* |; O
静脉采外周血培养也出现过这种情况，红细胞稍多些，粘连在培养瓶底，吹不散，团块状，像破网，很想知道原因

1179240331

回复 daifenghao 的帖子1 H3 B# `# k, q; o* r+ S
! _& W7 @4 b2 D6 z
请问自体血浆吗？是否灭活呢？试过加8%未灭火自体血浆，会成团块

lyj-0017

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  j. ^; ^' P8 [7 @9 u4 Q( j1 m
7 f$ M5 k2 K+ B: U' t5 z跟你说的现象一样，MNC贴壁之前都是吹散的，放入培养箱贴壁之后，培养上清中就会出现团块状物质，就是网状粘连，培养袋中底部铺成一层膜。难道就是红细胞过多的原因？或者是分离MNC后，清洗过程还有残留的少量血浆？

lyj-0017

回复 1179240331 的帖子$ |6 ]( T% g$ x3 S8 U8 n6 \
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那你们后来如何处理的呢？处理之后情况有所改善吗？