请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

硕果累累_555

细胞图片不清晰，有可能是转袋没有拍散细胞聚集生长，但看着不像，还有一种可能是培养细胞所用器皿或者瓶袋的质量不好，有微量残留造成的。

lyj-0017

回复 daifenghao 的帖子5 L1 O& d  z* _* y  {! c

" `! q$ s' D, n5 P7 Y6 O没有添加血浆，我们不用血液离心完后的血浆的

lyj-0017

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. g. v: A. F- y* }$ K; g: \
/ X0 r& |. I4 V9 o$ i) e会不会是我们分离白膜层之后，清洗细胞不够，导致残留的血浆也一同加入培养袋中了呢？

lyj-0017

回复 孙帅帅 的帖子" E/ b9 {( F2 I

  Z* ]; a! U  A- R: n8 c1 l我知道你说的这种操作，关键是你们是用50-100ml外周血分离MNC，我们是机采分离MNC，机采采集的MNC数量肯定比前者数量要多的多，这两种方式的培养情况肯定不一样的

lyj-0017

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1 \8 V: h% {9 G, q* S+ a
6 ]. N8 e- V% V# B; I) U我们转袋之前都是把细胞吹散的，会不会是细胞密度太大的缘故呢？* F3 ^; n* S: X
另外，我们用的都是康宁的瓶子，TAKARA的袋子，质量应该没问题吧

sunny.yc

回复 sunny.yc 的帖子# K0 w& @( U2 }1 [6 }

# P6 D: p' |( k; Y) V% w我们之前也遇到过这个情况，当时是在包被过的培养瓶中，聚团非常大，而且瓶中的散落的细胞几乎没多少了，细胞碎片也比较多，吹打开也没用，过段时间还会重新聚集。
& U+ _5 T+ l& a+ U$ c这种情况也咨询过别人，得到的一种答案我觉得还比较靠谱，就是，细胞形成集落了，但我感觉还是细胞受刺激过度。
# b% h4 x% j* [9 R+ v% h: u  b( S是不是你的细胞因子浓度太高导致的呢？

1179240331

# h/ M' `, n0 [# K& O( y, y; z7 Q# @+ Q' O6 l" Q2 w* C: R- y
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* u, f! Z$ I/ s/ B. M" ?% K' |6 n+ ]( T0 Y% n, l* I9 s: j2 K& X
静脉采外周血培养也出现过这种情况，红细胞稍多些，粘连在培养瓶底，吹不散，团块状，像破网，很想知道原因

1179240331

回复 daifenghao 的帖子1 o+ D* F+ r# j" M9 ^/ K  I* L* E

  u0 X3 A# i* k1 `( x) P$ n* r请问自体血浆吗？是否灭活呢？试过加8%未灭火自体血浆，会成团块

lyj-0017

回复 1179240331 的帖子5 F% @8 o! |4 x8 Q. g  _3 j" `4 b
& ]; A, K/ O6 j/ h
跟你说的现象一样，MNC贴壁之前都是吹散的，放入培养箱贴壁之后，培养上清中就会出现团块状物质，就是网状粘连，培养袋中底部铺成一层膜。难道就是红细胞过多的原因？或者是分离MNC后，清洗过程还有残留的少量血浆？

lyj-0017

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9 O% U8 l, U! a' d. y那你们后来如何处理的呢？处理之后情况有所改善吗？