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楼主: lyj-0017
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请教CIK培养过程中出现的絮状物问题!!!   [复制链接]

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11楼
发表于 2013-6-14 13:42 |只看该作者
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回复 呼吸 的帖子3 f" U0 ]7 j" B3 c0 Q6 z6 P4 p6 n9 r

2 r4 q4 f. W' n$ y. N  @& w7 {) B使用分离机分离时,采集人员肯定都是按照采集MNC的设定流程操作,这个应该不会错吧。
5 q) Q$ r% Q& C1 u8 A% @/ t您指的杂细胞是指什么细胞呢,转袋过滤是要过滤掉什么成分呢?
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12楼
发表于 2013-6-14 13:52 |只看该作者
回复 chenguangyu 的帖子2 y! ]- q5 a# N* ?$ ~5 Q, l

7 U. Y; j8 Q- U  K9 w+ s请问你们是用分离机采集MNC吗?2 ?' q( c% ?) [' P
我感觉细胞转袋之后第二天看时,培养袋底部有一层膜状物质,用手轻按就会浮起来变成絮状,在显微镜下观察这些絮状物发现,絮状物都是细胞粘连在一起,这样对细胞后续培养会有什么影响呢?5 n4 ~" ^! M% z* D0 P
到底为什么这些细胞会粘连在一起呢?还是因为细胞密度太大?抑或是转袋之前没有清洗干净血浆成分?
- j8 V# E% W1 U5 |* T( [5 N6 B
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13楼
发表于 2013-6-14 13:53 |只看该作者
是单独的这个病人还是所有的病人都是这样的?
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14楼
发表于 2013-6-14 13:53 |只看该作者
回复 lizzy_81 的帖子1 X& E! k+ F9 ^, @8 Z
" P* J0 G5 l. d8 X$ S7 c
嗯,也许有这个原因,以后制备时注意一下

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15楼
发表于 2013-6-14 13:55 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子
9 ?7 z4 q6 l# ^6 g3 S0 F9 ?7 A3 W, {3 s7 K6 D0 L) J/ w; \
直接采集~~  “同一个人的两个培养袋,一个出现絮状物,一个却是长得不错” 这个就比较奇怪了。你们是用一步法分离外周血mnc吗?
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16楼
发表于 2013-6-14 13:55 |只看该作者
回复 sheepthief 的帖子* v( I/ P3 g" C. V
5 P7 d7 ~. E3 A, x. ]  R
是有的病人这样,有的不这样,并且,有的病人刚开始时还没有,但是培养几天之后才变成这样,您给帮忙分析一下

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17楼
发表于 2013-6-14 13:59 |只看该作者
回复 孙帅帅 的帖子9 |% m# v9 d4 _! [0 S9 e
. d  A! c7 Z+ E; E. _3 A4 ]% Y
是啊,我也很奇怪为什么会这样。
8 y4 R0 a% `  R# u* L5 c1 [我们是使用分离机采集MNC,而不是直接采血,你们是采集50-100ml外周血进行分离吧?5 d. F0 y: n3 I5 m
什么是一步法分离外周血MNC?

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18楼
发表于 2013-6-14 16:16 |只看该作者
有没有添加血浆?若是有,血浆最多只能加1.5%含量
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19楼
发表于 2013-6-14 16:24 |只看该作者
又一次我添加了3%血浆,第二天观察出现跟楼主一样的情形,判断可能是由于血浆浓度加高了

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20楼
发表于 2013-6-14 16:56 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子
$ `6 L& G" O. I4 u1 k& |/ Y, w: B5 H) W& O5 k- D/ I- `
就是用Ficoll分离外周血MNC,这样分离的比较纯~~  我们都是用一步法分离的,你去网上找找 很简单的!
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