请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

lyj-0017

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( }6 }: _9 U+ ?2 Z
2 E% n! G$ u# ^; n3 q9 _8 E使用分离机分离时，采集人员肯定都是按照采集MNC的设定流程操作，这个应该不会错吧。
8 E5 m! ?6 s& D3 L您指的杂细胞是指什么细胞呢，转袋过滤是要过滤掉什么成分呢？

lyj-0017

回复 chenguangyu 的帖子
3 E, v* R" O7 T! T1 R# g: |; u0 r- G3 k, ^1 |
请问你们是用分离机采集MNC吗？0 }* K  \9 y6 H- ^6 n/ \- k3 `8 h
我感觉细胞转袋之后第二天看时，培养袋底部有一层膜状物质，用手轻按就会浮起来变成絮状，在显微镜下观察这些絮状物发现，絮状物都是细胞粘连在一起，这样对细胞后续培养会有什么影响呢？0 t0 D& r! _3 W
到底为什么这些细胞会粘连在一起呢？还是因为细胞密度太大？抑或是转袋之前没有清洗干净血浆成分？
3 ~4 c5 a. l' H5 I( H7 ]( i3 u2 K) W

sheepthief

是单独的这个病人还是所有的病人都是这样的？

lyj-0017

回复 lizzy_81 的帖子4 @. B) N3 Q/ z3 W$ E9 q

5 b  Q" E7 a4 V+ ^2 ]嗯，也许有这个原因，以后制备时注意一下

孙帅帅

回复 lyj-0017 的帖子
/ g) ~2 |7 {( v% g/ h+ G$ M9 ]/ m0 b( Z+ P; y& i; {
直接采集~~  “同一个人的两个培养袋，一个出现絮状物，一个却是长得不错” 这个就比较奇怪了。你们是用一步法分离外周血mnc吗？

lyj-0017

回复 sheepthief 的帖子' x2 w, ^( s5 z2 d$ m% V

, z2 w+ }4 l4 r0 p+ J3 \0 P5 H是有的病人这样，有的不这样，并且，有的病人刚开始时还没有，但是培养几天之后才变成这样，您给帮忙分析一下

lyj-0017

回复 孙帅帅 的帖子+ A. |, O9 |9 Q6 }# P- z

) Y" Y0 _2 Z5 G# Z# z是啊，我也很奇怪为什么会这样。
1 R. Y' M2 g( K2 ?/ V% D8 y我们是使用分离机采集MNC，而不是直接采血，你们是采集50-100ml外周血进行分离吧？
1 l! P$ k0 a, `' n. |/ H7 [# d什么是一步法分离外周血MNC？

daifenghao

有没有添加血浆？若是有，血浆最多只能加1.5%含量

daifenghao

又一次我添加了3%血浆，第二天观察出现跟楼主一样的情形，判断可能是由于血浆浓度加高了

孙帅帅

回复 lyj-0017 的帖子7 f5 K& o: T' N
5 W5 {2 B1 _( N! }" p8 d
就是用Ficoll分离外周血MNC，这样分离的比较纯~~  我们都是用一步法分离的，你去网上找找 很简单的！