请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

lousia04306

培养袋中的细胞需要进行过滤，里面有细胞聚集的现象

spring1221

回复 lyj-0017 的帖子- v. V4 e- s2 o0 y* S  w' W* N7 a

) z0 K& ^8 X/ m# Y  r楼主，你好。你们出现的情况我也遇到过，我认为是细胞量过大的问题，我们采取的处理方法是添加一定量的白蛋白，还有就是cik的培养过程中特别是要加液时要注意进行摇晃或者吹打。另外需要注意的是培养的cik在采集过程中要进行过滤，希望能解决你的问题。

lyj-0017

回复 spring1221 的帖子/ b# r: j3 B- V

5 X. J3 |0 l5 q* t- A5 P% x非常感谢，经验之谈！
  M0 E% u  R( Y& J+ a我也觉得是细胞量过大的问题，白蛋白是加到哪里呢？清洗的PBS还是培养液中？其余的措施都按照你说的注意一下，再观察一下吧。* K- z% S3 X7 v% s7 D
那么你们以后的培养过程中也还有这种情况出现吗？

lyj-0017

回复 lousia04306 的帖子. Z$ g6 {0 m& l8 z+ c8 F: m

: F# X( s! x. l. P0 H我就是想知道细胞聚集的原因啊？可否有合理的解释呢？

spring1221

回复 lyj-0017 的帖子
) O) n, r+ g6 F- q+ t1 ?: d5 X& q
+ K6 {% i! U$ y9 z白蛋白是直接添加到培养液中的。我只遇到过2次，挺小概率的，感觉还是要注意，在加液过程中的摇晃吹打。最近没有出现。

lyj-0017

回复 spring1221 的帖子  l7 T" ]9 A- y
. L9 G% \, t2 Z; K
你们是直接采集外周血分离MNC还是机采MNC呢？培养都是用培养瓶而不用培养袋吗？

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子
* Z9 c- U0 a% }: M# m* h) I/ d* }: G& E3 U3 _
不好说，我感觉你们的细胞因子添加量普遍略高，比如这么给您举个例子，同样是一样浓度的细胞因子添加量，平行试验，不同的样品来源，耐受程度是不一样的，有的样品聚团就很厉害，有的样品聚团就要少很多，对于CIK培养我做过不少，我建议你们可以尝试一下减少细胞因子的添加量，最起码试一下也好吧，呵呵

xu_shufen

此种情况有时会遇到，可能是纤维蛋白质类物质。是否与分离的单核细胞中，血小板的多少有关。

daifenghao

回复 lyj-0017 的帖子/ v% h$ n5 K& `2 a( k
$ |3 \; Q0 K' K/ i% }' G4 H4 k
我们是血浆含量加3%就出现了这个情况

1179240331

回复 lyj-0017 的帖子
5 }& c' b8 Y3 k& Z- H8 L' W7 w( }2 q" J, N5 T2 V
一般到最后，已经洗过了3次，估计血浆物质剩下的不多了。听其他人做的，采血混合不均有凝血的时候，也出现过细胞团块