请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

lousia04306

培养袋中的细胞需要进行过滤，里面有细胞聚集的现象

spring1221

回复 lyj-0017 的帖子
9 T# h$ a& G, U% Q% S" `, J
6 n8 d6 z2 O: \, x2 b楼主，你好。你们出现的情况我也遇到过，我认为是细胞量过大的问题，我们采取的处理方法是添加一定量的白蛋白，还有就是cik的培养过程中特别是要加液时要注意进行摇晃或者吹打。另外需要注意的是培养的cik在采集过程中要进行过滤，希望能解决你的问题。

lyj-0017

回复 spring1221 的帖子9 C4 J& Z8 J4 c0 y! E$ B1 `. i8 [
/ W* j: m5 |, w
非常感谢，经验之谈！0 }# q3 f- b2 {
我也觉得是细胞量过大的问题，白蛋白是加到哪里呢？清洗的PBS还是培养液中？其余的措施都按照你说的注意一下，再观察一下吧。- I, q. f* k5 H$ K
那么你们以后的培养过程中也还有这种情况出现吗？

lyj-0017

回复 lousia04306 的帖子
- `* W# h5 }  W" |- i- [' z& P) P- s) h6 R# r
我就是想知道细胞聚集的原因啊？可否有合理的解释呢？

spring1221

回复 lyj-0017 的帖子
, J& }* ?( `! \  p( n/ I0 e9 @  K6 e5 P
白蛋白是直接添加到培养液中的。我只遇到过2次，挺小概率的，感觉还是要注意，在加液过程中的摇晃吹打。最近没有出现。

lyj-0017

回复 spring1221 的帖子
, Q$ p6 O; ^1 J; H3 b+ L
& V' W6 q4 n* B4 o你们是直接采集外周血分离MNC还是机采MNC呢？培养都是用培养瓶而不用培养袋吗？

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子0 l4 `4 m- M4 T

& y8 r; ~9 [: V( m' F不好说，我感觉你们的细胞因子添加量普遍略高，比如这么给您举个例子，同样是一样浓度的细胞因子添加量，平行试验，不同的样品来源，耐受程度是不一样的，有的样品聚团就很厉害，有的样品聚团就要少很多，对于CIK培养我做过不少，我建议你们可以尝试一下减少细胞因子的添加量，最起码试一下也好吧，呵呵

xu_shufen

此种情况有时会遇到，可能是纤维蛋白质类物质。是否与分离的单核细胞中，血小板的多少有关。

daifenghao

回复 lyj-0017 的帖子
+ f! F/ w" p+ i5 J1 U
9 U9 N$ `' Y- u, }* k( a4 e我们是血浆含量加3%就出现了这个情况

1179240331

回复 lyj-0017 的帖子4 n" o7 _7 Y7 k! ^% B2 N

5 F8 v1 z$ t# Z3 i' c! A一般到最后，已经洗过了3次，估计血浆物质剩下的不多了。听其他人做的，采血混合不均有凝血的时候，也出现过细胞团块