请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

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回复 daifenghao 的帖子0 N5 V3 `7 N) T. Q( `+ Y6 r

9 ?' ~7 {/ B0 b3 f# `  s同问同问

sunny.yc

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6 P; @2 W7 n+ L0 `% D/ g# j* A3 A* q+ p' F) Z7 P6 O3 d
你们的血浆经过灭活处理了吗

lyj-0017

回复 sunny.yc 的帖子# H7 B, B. E! a$ c; M$ M; h/ _

+ s, {$ e5 `# P6 z- f  a: H, j实际上，在贴壁过程中就已经出现絮状物了，此时是没有添加细胞因子的。但是，有的细胞确实是在培养后出现絮状物的，可能还是不同人对相同细胞因子的耐受程度不一样吧，还需要多积累经验啊，多谢~

lyj-0017

回复 xu_shufen 的帖子
1 {0 ~  U* i7 @) @4 o4 W! g
' a: e9 L( E: E嗯，我也认为是纤维蛋白类物质引起的，也可能是细胞量过大的原因，血小板的可能不大，因为分离MNC时都是先把白膜层上方大部分液体先吸掉的，血小板剩余量应该不多

lyj-0017

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. h3 |% V0 {) N% u+ z9 y4 C% R/ W$ P& Q
添加进去的应该用血清吧？血浆里面本身就含有大量纤维蛋白，加入血浆后出现絮状物应该在情理之中才对

lyj-0017

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+ x8 n4 @8 c1 P' ?! y, ~9 G/ T- r& k* @3 [2 B8 b2 [# s  U' v
我们现在也在注意血浆物质残留的问题了，分离MNC时也已经严格清洗了，观察一下看看吧。
. D* p  j5 H" |# Q/ w采血要是混合不均匀的话，凝血也会使得分离的MNC量减少吧。2 G$ Y4 e& o7 D: j) H1 v
你的意思他们分离出MNC后进行培养时出现细胞团块吗？

sunny.yc

回复 lyj-0017 的帖子: |# l* z$ m9 c+ X9 X1 L7 ?

( w5 H: q/ U# t* Y. R6 S如果贴壁的时候有絮状物，是不是血浆的问题，你们用的血浆经过灭活处理过的吗？

lyj-0017

回复 sunny.yc 的帖子  l) ]! P# [& U" P2 F1 R7 R- l

5 @) d9 P, t+ c$ J0 F我们贴壁的时候只加培养基，没有同时添加血浆（加血浆还是血清？）。3 z/ N$ O- U$ U" h& u/ }3 E
如果加点白蛋白会不会好点呢？

lyj-0017

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8 C2 f# i, w4 c- e) \: Z& g4 ^
9 ], P& r- k3 z8 ]& M, ]) O最近细胞生长的状态如你所说，袋内白膜确实是逐渐自动散开了，并且细胞长势还不错。但是有时候，加液后，原本长得不错的细胞会聚团，像是细胞死掉了聚团？这是什么原因呢？

lyj-0017

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* m+ J- _1 g6 w7 C+ t' E4 A' M2 i! B4 R* T
我现在发现，细胞铺袋后不要摇晃袋，让细胞自己调整，过几天白色丝膜就会自动消失，你们可以观察一下试试