请教CIK培养过程中出现的絮状物问题！！！

lyj-0017

回复 spring1221 的帖子5 ^! D( u/ Y7 a+ }

; d" H8 n; P) z3 x' P( ]非常感谢，经验之谈！
6 F! i. H2 N' \1 y+ V$ [我也觉得是细胞量过大的问题，白蛋白是加到哪里呢？清洗的PBS还是培养液中？其余的措施都按照你说的注意一下，再观察一下吧。
4 F; D$ L" n7 K) Q那么你们以后的培养过程中也还有这种情况出现吗？

lyj-0017

回复 lousia04306 的帖子
* X# e* K" U/ {6 |) m! q
9 j) s, g* i% E# u, K我就是想知道细胞聚集的原因啊？可否有合理的解释呢？

lyj-0017

回复 spring1221 的帖子
& X6 E7 n4 F' T9 j1 a/ O- J1 Y
5 c7 F- Y5 M4 ~" n1 x2 \6 V+ e, V# H你们是直接采集外周血分离MNC还是机采MNC呢？培养都是用培养瓶而不用培养袋吗？

lyj-0017

回复 sunny.yc 的帖子* m0 ]' Y8 r0 W& o9 Y; i8 S

" n( J  a0 Z# ~* f, ?实际上，在贴壁过程中就已经出现絮状物了，此时是没有添加细胞因子的。但是，有的细胞确实是在培养后出现絮状物的，可能还是不同人对相同细胞因子的耐受程度不一样吧，还需要多积累经验啊，多谢~

lyj-0017

回复 xu_shufen 的帖子
( {8 S, Z5 _8 G4 F" }- V  C0 B; }2 u; A0 v- D# E) `; q
嗯，我也认为是纤维蛋白类物质引起的，也可能是细胞量过大的原因，血小板的可能不大，因为分离MNC时都是先把白膜层上方大部分液体先吸掉的，血小板剩余量应该不多

lyj-0017

回复 daifenghao 的帖子
0 E3 _( C9 E3 `/ @+ F/ N0 u, I$ f) \/ [8 G- I7 D% V6 C
添加进去的应该用血清吧？血浆里面本身就含有大量纤维蛋白，加入血浆后出现絮状物应该在情理之中才对

lyj-0017

回复 1179240331 的帖子' H- M, r4 X" ]) \$ u7 }) q. [

3 p+ a1 g6 l" D" v( |我们现在也在注意血浆物质残留的问题了，分离MNC时也已经严格清洗了，观察一下看看吧。
% M) \* f" q- g' l2 }- L采血要是混合不均匀的话，凝血也会使得分离的MNC量减少吧。; Z' ?/ g# a, q1 O6 B
你的意思他们分离出MNC后进行培养时出现细胞团块吗？

lyj-0017

回复 sunny.yc 的帖子3 }/ ?! L7 x0 M/ i
$ Z; _( i- q, t- u. y8 N5 I
我们贴壁的时候只加培养基，没有同时添加血浆（加血浆还是血清？）。' b5 c- q5 L& u" K
如果加点白蛋白会不会好点呢？

lyj-0017

回复 chenguangyu 的帖子4 c: L& [( @1 Z: l% E& m

9 x& G6 U5 \4 T# l1 S' k) q" }8 J/ |最近细胞生长的状态如你所说，袋内白膜确实是逐渐自动散开了，并且细胞长势还不错。但是有时候，加液后，原本长得不错的细胞会聚团，像是细胞死掉了聚团？这是什么原因呢？

lyj-0017

回复 daifenghao 的帖子7 `7 i, s: P8 V) R% x
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我现在发现，细胞铺袋后不要摇晃袋，让细胞自己调整，过几天白色丝膜就会自动消失，你们可以观察一下试试