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请教CIK培养过程中出现的絮状物问题!!!   [复制链接]

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楼主
发表于 2013-6-13 22:51 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
我们是采用血液分离机分离外周血单个核细胞,然后加入培养袋中诱导培养CIK,这种方式采集的单个核细胞量较大。
3 I8 B+ A* X% k我们在培养过程中发现,贴壁后的悬浮细胞转入培养袋中后第二日,或者加入培养袋后两三天后,在培养袋中会出现很多絮状物,我想问的是大家有没有遇到过这种情况呢?大家也帮忙分析一下原因吧,附图片见下。
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沙发
发表于 2013-6-14 13:34 |显示全部帖子
回复 easternliu 的帖子
- r6 v1 t* j9 z' F7 o4 `
" Y# Q6 ?3 J4 w6 ^" [9 O+ P; O, I! ~你们是直接采集外周血还是使用血液分离机呢?

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藤椅
发表于 2013-6-14 13:35 |显示全部帖子
回复 sunny.yc 的帖子
8 h$ ^, V' W7 g2 a! s- L6 _& l$ D- G% k: E4 ]) J" M% B
不好意思啊,照片拍的时候有点反光,像素也有点低

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板凳
发表于 2013-6-14 13:39 |显示全部帖子
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回复 孙帅帅 的帖子4 z/ N. {0 K. m1 u9 C. a+ E" q

4 G1 v1 C. w% r5 T请问你们是直接采集外周血分离MNC还是机采?
- x9 a4 j  ]/ X9 p3 A! f. @' F肯定不是细菌感染,染菌我还是能看出来的。
8 c8 g2 `. Y7 m2 P. j; L) h我们是有的细胞是克隆状,但有的就确实会出现絮状物,并且,同一个人的两个培养袋,一个出现絮状物,一个却是长得不错,不知道到底哪里出问题了
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报纸
发表于 2013-6-14 13:42 |显示全部帖子
回复 呼吸 的帖子' _$ T% |- ^2 d2 j" |& H
( b- S* b- y4 U
使用分离机分离时,采集人员肯定都是按照采集MNC的设定流程操作,这个应该不会错吧。
6 @* J5 k; e$ {, `  o4 F您指的杂细胞是指什么细胞呢,转袋过滤是要过滤掉什么成分呢?
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地板
发表于 2013-6-14 13:52 |显示全部帖子
回复 chenguangyu 的帖子0 ?0 L+ S. s% ~0 x
+ o8 v, m9 a' J; Y
请问你们是用分离机采集MNC吗?
* W2 |) L0 r5 L9 G: ?0 f我感觉细胞转袋之后第二天看时,培养袋底部有一层膜状物质,用手轻按就会浮起来变成絮状,在显微镜下观察这些絮状物发现,絮状物都是细胞粘连在一起,这样对细胞后续培养会有什么影响呢?
" U. e/ b, P* g0 _) E! |到底为什么这些细胞会粘连在一起呢?还是因为细胞密度太大?抑或是转袋之前没有清洗干净血浆成分?9 d1 {# E  A: |* U
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发表于 2013-6-14 13:53 |显示全部帖子
回复 lizzy_81 的帖子# \: y0 f5 L# S# Y) y9 s, m7 D
9 p' \, `& Q/ @7 A. d
嗯,也许有这个原因,以后制备时注意一下

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8
发表于 2013-6-14 13:55 |显示全部帖子
回复 sheepthief 的帖子9 `7 b' U% @9 n& m. V0 \

7 U1 n- t' B* i, _% w是有的病人这样,有的不这样,并且,有的病人刚开始时还没有,但是培养几天之后才变成这样,您给帮忙分析一下

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发表于 2013-6-14 13:59 |显示全部帖子
回复 孙帅帅 的帖子8 C# A0 B2 H; w( ?# K

9 D. U2 w) \( a: `是啊,我也很奇怪为什么会这样。; G5 F* @3 L2 l) Z/ D
我们是使用分离机采集MNC,而不是直接采血,你们是采集50-100ml外周血进行分离吧?/ w; k& p& h% O1 Y) q, _' F
什么是一步法分离外周血MNC?

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发表于 2013-6-14 17:35 |显示全部帖子
回复 daifenghao 的帖子
, V. ?- m# ^) C3 g% g5 q1 q& w6 E) Y  o; q" m" B; ~
没有添加血浆,我们不用血液离心完后的血浆的
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