EDTA

lmh_yixue

EDTA传代细胞时，EDTA是否对细胞具有潜在危害

zsc78

EDTA的影响肯定是有的，消化完后用PBS或培养基漂洗细胞2次就能减少影响。ES的消化有较好的替代物，如胶原酶、Accutase等。

zpzp0312

"我们看到文献有只用EDTA传代ES的"
. q$ b; t7 Z* n  q' {  H如果这样的话，即使有影响，也只能这样做9 p, g5 Q0 |5 W
要不你就说说你的实验具体要做什么吧

lmh_yixue

回复 zpzp0312 的帖子3 U8 i# V' `6 u
) H, Z7 F5 _, @4 V* L& P* X' v5 j
谢谢，我们看到文献有只用EDTA传代ES的，但是我们想知道EDTA是否会对ES产生不好的影响，用这样的ES来做后续试验可能会对结构有影响。

zpzp0312

一定会的，所以最好用一些替代物，胶原酶或者Accutase，但也有一些操作上的不方便，比如消化不完全，消化后不易离散。: R! e8 b) H/ P  C/ W5 _
但目前大部分人都是使用胰酶的，所以如果对细胞不是要求很高，用胰酶足够了

xiangyu83

好像影响不大。如果试验比较精细，可以消化完成后，用10倍含血清培养基终止，然后离心弃上清，再用培养基重悬。这样就排除了EDTA对细胞潜在影响。

mjc588

钙离子结合剂

lmh_yixue

回复 ipadworm 的帖子, C, B: B. K& \$ f% o
* y) ?  R) Y) V$ Z
谢谢！我看到文献中有只用0.05mM的EDTA传代ES的，故考虑EDTA是否会影响ES

lmh_yixue

回复 wangzhiqi86 的帖子
1 X5 I, V$ J6 G1 {; [/ _2 v
; Y" @& C# I' [3 j6 O谢谢！我看到文献中有只用0.05mM的EDTA传代ES的，想知道EDTA是否会影响ES

wangzhiqi86

取决于你的浓度和作用时间，楼主的ETDA应该是和胰酶一起作用消化细胞吧，一般那那么一点，不会有影响，因为新鲜培养基自然会稀释它的作用