CIK加液后产生絮状物，大家来分析一下原因！！！

lyj-0017

CIK细胞起始阶段生长良好，细胞集落较多，但是在加液之后，细胞集落变大，并且聚团较大且有部分集落贴壁，后续培养过程中便会发现培养袋中出现絮状物，以至于后续培养过程中一直存在絮状物，细胞也死亡较多，不知道大家有没有遇到过这种情况？是我加液的问题还是别的什么原因导致的呢？

jenvy121

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  C4 L6 _4 ^6 \' [8 ~& w0 @直接采外周血，数量也是因人而异吧

lyj-0017

回复 jenvy121 的帖子* ]6 n( M; W- }+ z0 H6 @/ V
0 ]* a+ ^1 }& S" J  H% z) u- {
你们用的是机采吗？还是直接采外周血？现在培养一次最多能获得多少细胞呢？

jenvy121

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  G: w3 u' Y0 L( E; P% h* H0 u+ v7 Z! \) K5 _
对的，我们每次换液计算好用的培养基的量，然后预热

lyj-0017

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  Z* N+ @: Y% V' n2 E$ w6 Y
+ P+ X+ Q* q7 j/ j$ q4 {, |培养体系得看分离得到的单个核细胞数量，根据5~10X10^5/ml的细胞密度铺袋。你后面说的预热多少没看懂，应该是问预热多少培养基吧？一般预热一瓶培养基，培养基手感不那么凉即可添加。酸碱失衡我觉得不可避免，但是不会出现太大失衡~

jenvy121

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  ~( x4 k4 y: n! \2 n" Z% d9 l$ {5 M( w; o
不知你们的培养体系有多大？一般用多少预热多少，而且预热的时间也不长，不会出现很大的酸碱失衡吧

sunny.yc

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6 O* n# P9 \7 v/ s, E: l0 s8 f3 e* p; }; r$ J! i  R. m
可能我了解得还太少，持续加干扰素还是第一次听到，试试看吧！

lyj-0017

回复 sunny.yc 的帖子: K" r5 v( S; }+ S+ O! k% W

( i9 h, a* Q  N  B最近看文献看到有这么做的，D0天添加IFN-r和anti-CD3 mAb,第二天添加IL-2，后续培养以IFN-r和IL-2维持，按文献所说扩增倍数还挺高的~

sunny.yc

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( u/ U& T4 t  t# K
* c4 @# e) X7 Z9 j1 r' W建议还是分开加，挺多文献都有这样的描述，而且理论看起来都很合理的, I4 q6 ]9 a$ e9 X
4 E7 Z3 ]7 @- E
如果你还是在纠结的话，建议你连续做几个平行实验看看，可能对于你的培养体系来说，D0加一种或加三种影响不大呢

lyj-0017

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! a6 B0 g6 V  K7 {& M0 p. ~) D' S- N: ~1 `1 o
记错了，IFN-r应该是1000U/ml。现在纠结的问题就是到底可不可以D0天三种细胞因子同时加？与传统工艺效果哪个更好一些。。。