如何选择恰当的细胞分选柱

miltenyi

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美天旎的分选柱分几类，如MS、LS、LD级autoMACS column 等，那么，这些有什么区别呢，您在实验中又该如何去选择适合您的分选柱呢？$ p4 _# R2 }- q: q& l

5 P2 w3 s8 ]; t3 g: k) U  d' ?4 L首先，让我们来认识一下分选柱：5 J8 `0 ^3 F0 T+ b; U

- j7 |3 X" {7 W6 {" O0 m. I美天旎的分选柱（Column）是MACS技术的核心，其特点如下：
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• 填充有不同规格的铁珠，可分选或者去除10^7-10^10细胞；
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•     表面亲水包被，不损伤细胞，同时保证流速；
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•     可以将磁场放大1000-10000倍，因此只需极少的细胞表位被识别即可被磁场捕获，从而为后续实验预留足够抗原表位，如磁珠分选后的细胞无需切除磁珠即可直接染流式抗体，而不受影响。
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. V3 g8 F% [5 ?0 K$ U% Z我们知道，美天旎的MACS分选策略有阳性分选、去除分选，那我们就按两种分选策略来分析如何选择恰当的分选柱：, X( T$ q. [6 H/ X
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一、阳性分选9 a2 Y$ L! v5 J2 y
1、要分选的细胞数量：; A; h, r' E& P

2 S. q) c" X  T: k; @如下图所示：MS柱容纳的最大细胞上样量是2×10^8细胞（既包含阳性细胞又包含阴性细胞），而其能捕获的阳性细胞最多是10^7。: g0 s* T8 a" i0 T; M% ^

( X1 q1 f( W) o5 i0 u( v$ f如何选择恰当的细胞分选柱
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( ~% n  E) I3 @$ e2 V! I2、目的细胞是常见细胞还是稀有细胞/ [. _5 m4 ~4 J3 S1 g& S6 F

4 m$ o( z0 j2 I2 A0 O为了在分选稀有细胞（表达频率〈5%）时得到较更高的纯度，您可以使用两个分选柱：用一根分选柱进行一次分选后，阳性成份再过一次新的分选柱。
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3、大体积的细胞
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另外，如果您要分选的目的细胞是体积较大的特殊细胞，如原生动物细胞、人皮肤郎罕式细胞、鼻咽癌细胞、心肌细胞等，那推荐您使用Large cell column。因为大细胞柱的铁珠间隙足够大，容许这些特殊的大体积细胞顺利通过。
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二、去除分选: O3 n; x3 f: P! {

$ ~8 _! g# D1 [5 u- s- V( s0 \去除分选中需要考虑以下几个因素：
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% @1 p8 |6 q$ G. W% O% O7 _0 n% ]# l1 您使用MACS isolation kits 或MACS microbeads吗？
2 L$ t, a9 ]' ]$ E. w4 b3 }: J9 Y/ x! Y1 J
2 抗原表达强还是弱呢？+ l7 Y8 V2 ?9 Z5 p2 {) N. r, F4 N

: D4 s* k5 x- S1 e# }1 W5 s3 您需要更高的纯度还是回收率呢？
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; c( s7 h0 L( O4 您需要分选多少细胞？# b4 Y- {4 C& q
. L- r: f1 |) c
根据这几个因素，您可以按下图的标识来选择合适的去除分选柱。1 h- x9 }- C. @0 O) X

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: j- S3 e+ ~* e5 G# k8 l/ W1 I) ^以上，您知道如何选择分选柱了吗？$ c# d9 H& S5 B2 J( A0 N

' }4 X' F( m" K3 D如有疑问，您可以拨打800-820-2606- ?9 N& ?( g" n" O

, u2 @( l: h$ [" w' m1 A% g: F或者发邮件macs@miltenyibiotec.com.cn 咨询。

yuanshenyewu

MS用的还是多一点