肿瘤干细胞消化和流式检测如何保持细胞活性

412159616

无血清培养的悬浮肿瘤干细胞，能看到细胞的扩增。细胞照片如图：
& O, X) i3 i3 s! y, ?+ I# h. h- C  J$ B9 l0 g
( K0 G2 ]! l7 C- ^
/ y+ M2 E1 _5 g3 ^# K
但是用台盼蓝染色计数时，不管是否用胰酶消化处理过，镜下完全是一片蓝色，细胞数量没办法计算。上机做流式，细胞状态也都不好。2 [: @5 J' k, M% t4 f
9 B8 \6 ?& p9 `1 b) K
请教大神两个问题，0 O- d% w- `# X8 W! ~; r! K) \
1. 悬浮的细胞球怎么能消化成为单个细胞？
3 ]9 ?7 B0 @! e' \2. 悬浮培养细胞状态是否都不是很好，像我遇到的问题，应该如何解决呢？1 Q! z1 \9 R" v6 H' N8 [

412159616

回复 wuzhouying2132 的帖子
- y, K( q3 p" }  ~8 U" _8 u0 g- h- \3 W: H, r$ Z/ l4 P
可是细胞的扩增速度都还是不错的，这又是为什么呢？

412159616

回复 luyue6453 的帖子* D/ L; u$ d- L& s3 ]- G1 e

0 m. ^5 l# d7 e; I( \是养一段时间，出现聚团就用胰酶消化继续养的意思吗？

412159616

回复 luyue6453 的帖子! Q# U' p" `3 W
1 }7 p$ w1 ]% n+ Y3 w
这样子，是不是干细胞培养，初始的细胞密度最好在50000/mL以下会比较好？我还看到有建议5000以下的。