CIK细胞培养疑问

xiangbalao

最近养CIK细胞，细胞总是贴壁，悬浮细胞也少，加入CD3，IL-2，IL-1好像没起到作用，2 F/ Y& F  P5 A
一直贴壁，吹不下来。而且，加完因子后没有细胞克隆团产生。0 ?3 {, B' n, O6 `- z9 Y
还有一种情况是细胞一直不会扩增，养着养着就会凋亡，这会是什么原因？

yinfuhua

回复 xiangbalao 的帖子  w  \4 n  j: ?* m

( d  i  F& ]: O8 ?  Z先检查一下培养液，是否为培养悬浮细胞的；再看下细胞因子（进口、国产、因子浓度配制是否合适），对每种因子都要查验。另外，要检查一下培养体系是否有问题。一般来说，培养18-24h应该可以看到克隆团了。

孙帅帅

你是怎么取的单个核细胞？用的是健康人的外周血吗？还是脐血？培养基 使用的什么培养基啊？

xiangbalao

脐血，ficoll离心，培养基 vivo

大少爷

应该是因子的问题吧

xiangbalao

在线急等，哪位大侠碰到过这种情况，帮忙具体分析分析。。。

meister

回复 xiangbalao 的帖子- A" f% g' r1 L
( [% z) b8 ^6 [! `" R
最大可能是抗体出问题了。
! x9 g" C" L, O1 E$ L次之IL-2的问题。
+ n2 {, Z. k  h1 f. L( C1 r其他原因可能比较小。
. U- t' c- u' B- D, J' Q: R) S" {' d

淡定的摩羯

建议做一下支原体检测
2 E+ ?' W; T. a2 r  k+ @: \7 q/ N

xiangbalao

回复 meister 的帖子
! h# ?. C* s& o' t* F$ ^
8 N1 C0 @4 p$ g7 s. {8 w抗体？

沙漠狐o0

请问培养基中为何要加IL-1呢？
1 B: t8 T! \3 s8 a培养基中添加因子浓度对了么？CD3、IL-2的浓度有没有弄错？