CIK细胞培养疑问

xiangbalao

最近养CIK细胞，细胞总是贴壁，悬浮细胞也少，加入CD3，IL-2，IL-1好像没起到作用，
7 W/ L5 v/ [* O' A! m4 l! H一直贴壁，吹不下来。而且，加完因子后没有细胞克隆团产生。
! _+ P/ a% _- S0 K8 D3 H还有一种情况是细胞一直不会扩增，养着养着就会凋亡，这会是什么原因？

yinfuhua

回复 xiangbalao 的帖子! o) }0 g  ?& l! i4 s8 _
1 A7 S. _3 x. r& U
先检查一下培养液，是否为培养悬浮细胞的；再看下细胞因子（进口、国产、因子浓度配制是否合适），对每种因子都要查验。另外，要检查一下培养体系是否有问题。一般来说，培养18-24h应该可以看到克隆团了。

孙帅帅

你是怎么取的单个核细胞？用的是健康人的外周血吗？还是脐血？培养基 使用的什么培养基啊？

xiangbalao

脐血，ficoll离心，培养基 vivo

大少爷

应该是因子的问题吧

xiangbalao

在线急等，哪位大侠碰到过这种情况，帮忙具体分析分析。。。

meister

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/ f" C; ]8 w7 g; Q$ j. H, s* Q* v. r/ ^
最大可能是抗体出问题了。1 `9 T/ c; U7 l! K- i( _/ c6 L
次之IL-2的问题。
+ n9 G, Z$ ~- Q9 M3 I其他原因可能比较小。! Z5 R9 h0 h! u1 U

淡定的摩羯

建议做一下支原体检测
  U+ l4 p7 F; S/ V+ _

xiangbalao

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9 G6 t$ n7 F  p- t+ [$ {/ |6 v2 ~
9 `& h8 n. }; N  {- {, \( o- g# G抗体？

沙漠狐o0

请问培养基中为何要加IL-1呢？
2 L3 q/ C  W2 v8 K+ J7 A培养基中添加因子浓度对了么？CD3、IL-2的浓度有没有弄错？