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[讨论] 培养基的PH值会对HES的状态影响吗?   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-9-21 15:44 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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各位战友,最近细胞传代的时候出现问题,考虑各种原因,测了培养基的PH值在7.5,后重新配置还在7.48-7.5左右,请问这种PH回对细胞的生命状态有影响吗,大家每次配置培养基 会不会测量PH值呢,请分享经验,谢谢
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沙发
发表于 2013-9-22 13:08 |只看该作者
配制好以后用1N HCl 调节pH
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藤椅
发表于 2013-9-23 10:33 |只看该作者
回复 feifangli 的帖子4 H  y0 h% P5 ]8 d$ l- g7 O& v
! ?- j8 Y' B: `7 m) m
我买的直接就是gibco的knockout DMEM/DMEM-F12,你是说配好之后就直接检测,然后再过滤除菌还是怎么办?谢谢不吝赐教
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板凳
发表于 2013-9-24 10:15 |只看该作者
回复 qiushuiwuhen 的帖子% R/ d* n* M" }: E/ _
" d1 [, ^& z) {' [; B* {5 S
我们买的粉末自己配置液体培养基,都是溶解后调节Ph,然后再过滤灭菌。如果买来是液体的,一般可以直接使用。
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报纸
发表于 2013-9-24 11:24 |只看该作者
PH和渗透压都会影响细胞的的生存状态~~
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地板
发表于 2013-9-25 09:10 |只看该作者
回复 孙帅帅 的帖子1 v8 b3 J: t2 H. v2 O

, B( J: n, X. C9 V. i) ^你的意思是如果买的就是knockout的DMEM/DMEM-F12,在加完各种营养因子之后还需要测下PH值,还是不用测直接用(上述试剂按照正常程序4度保存的)?谢谢!
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7楼
发表于 2013-9-25 09:52 |只看该作者
回复 qiushuiwuhen 的帖子: a0 f- N9 G* {% g7 l$ [
- U  y$ h$ Q3 j- \' A8 P3 h
买来的一直用就行了,如果放置太久谷氨酰胺失效颜色就变粉了,细胞贵重的话就不要用了,会收影响的,如果自己配的话一定要调PH值得,调完了再过滤,还是买现成液体的吧,贵不了很多钱,省不少事!本来做实验就够累心的,还因为配药这种可避免的事操心,不值得。
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8楼
发表于 2013-9-25 11:36 |只看该作者
回复 luyue6453 的帖子. P! w$ p! ]5 Z- i; z  H- T. v% a  j

+ k% j$ g4 Q" R' [' M你好,我买的就是knockout的DMEM/DMEM-F12成瓶的液体500ml,你的意思是在加完各种营养因子之后不用测直接用(上述试剂按照正常程序4度保存的)就行吗?一般1月那瓶500的就用完了?

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9楼
发表于 2013-9-26 09:24 |只看该作者
回复 qiushuiwuhen 的帖子# p$ L. G" t$ \) g) q" e

; }% R4 n7 \' E; _; R9 A) X9 D瓶装的500ml培养基都是调节好PH、渗透压等因素的,所以在配制成完全培养基时,如果添加的东西量少,一般对PH什么不构成影响,可以直接用。当然,如果是比较娇嫩的细胞,条件要求苛刻的,还是测下吧。刚买来的DMEM/DME-F12是可以低温(2-8℃)存放一段时间,一两个月没问题,当添加了血清、生长因子等,尽量短时间内用完
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10楼
发表于 2013-9-26 11:29 |只看该作者
回复 qiushuiwuhen 的帖子& m1 e0 z" W+ Y" Q! e
* K5 P" d7 A* z+ r$ F% `, Z
我们在养HES的时候 用碳酸氢钠和氯化钠调节PH和渗透压,但是培养基是我们自己配的!如果市场上买,培养基添加物应该给你们调好了!
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