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qiushuiwuhen

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楼主

发表于 2013-9-24 14:52 |只看该作者 |正序浏览 |打印

如题，请教各位战友关于HESC的冷冻protocal,之前的冷冻用的是10%DMSO+40%SR+50%培养基，问题是：解冻后的克隆几乎全部死掉，不管是在feederfree还是feeder-dependent的情况下，长势均不良好，请教各位冷冻解冻的经验，如能分享protocal更不胜感激。

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19楼

发表于 2013-10-10 10:31 |只看该作者

cs10是stem cell 的。可以用于HESC 和IPS的冻存

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waterbubble

新手上路

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18楼

发表于 2013-10-10 10:30 |只看该作者

CS10 is an animal protein-free, serum-free and defined cryopreservation medium containing 10% dimethyl sulfoxide (DMSO).

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qiushuiwuhen

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17楼

发表于 2013-9-29 15:45 |只看该作者

回复 waterbubble 的帖子! Z* { ]( ?2 @ A+ Y6 @
8 a g9 N; M! h
ＣＳ１０是何东东，没有听说过呀，是成品的冷冻液吗，并且终浓度１０ｕｍ是指的谁？谢谢

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qiushuiwuhen

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16楼

发表于 2013-9-29 15:44 |只看该作者

回复孙帅帅的帖子/ D8 m- ]+ ]7 E t1 _3 i ^1 n3 L

之前看一片nature protocal，说的是冷冻IPS用的就是10%ＤＭＳＯ＋９０％　ＦＢＳ，ＦＢＳ可以换成ＳＲ，但是比较证明克隆复苏率的情况，ＦＢＳ优于ＳＲ，准备下次试试，谢谢

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waterbubble

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15楼

发表于 2013-9-29 15:13 |只看该作者

我们用的冻存液是CS10+Y27632，终浓度为10um。

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孙帅帅

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14楼

发表于 2013-9-29 14:26 |只看该作者

http://www.stemcell8.cn/thread-69628-1-1.html
我们是用的10%DMSO+90%FBS 复苏效果还不错，主要是冻存的时候吹打细胞的时候不要吹打的太碎！

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希望之光

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13楼

发表于 2013-9-25 19:00 |只看该作者

回复 qiushuiwuhen 的帖子* A- ?! ]" c1 E% N' E

不需要加bFGF，用DF12和20%KSR重悬

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希望之光

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12楼

发表于 2013-9-25 18:59 |只看该作者

回复 qiushuiwuhen 的帖子6 x% ?2 S: Y: _7 u5 o0 w: u
8 N9 j$ m+ A3 T
成活率挺高的呀，主要是操作细节要注意。

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qiushuiwuhen

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11楼

发表于 2013-9-25 11:38 |只看该作者

回复星光灿烂的帖子
- m5 M4 R5 f( e$ w7 R0 m' B' K* C, q* {
十分感谢

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