脐血单个核细胞分离出现很多白色沉淀的问题

tianangelt

用Ficoll法分离脐血单个核细胞，吸出白膜层离心后，离心管底有很大一块白色沉淀（明显细胞没有那么多，大概是平时细胞沉淀的3倍），洗涤接种到培养瓶中后，镜下看到底部有一层白色东西，细胞点缀在上面；高倍镜下观察，底部的白色东西也是小圆透亮，以前没有出现过这种情况，请问大家遇到过这种情况吗？是什么原因造成的呢？

wind789

5 y% u3 P: D) ^; e7 p1 K/ u

" H. }' Q, ]2 n& q8 E难道是Ficoll密度不标准，血小板吸起来了？

lyj-0017

无图无真相

tianangelt

回复 wind789 的帖子
, z& u3 U! o( t
+ [$ _# t. E7 C1 {+ Z* \Ficoll一直都在用，之前没有出现过这个问题，也怀疑过是不是血小板，但洗涤的过程中怎么一点都没有洗掉呢，困惑……

tianangelt

回复 lyj-0017 的帖子
2 K; o$ J" E7 u- j
8 D, S3 w) k. A: |) B; w% ^. ]! K8 H有拍的照片，但不知如何上传

sdudai

我也出现过这种情况，应该是细胞碎片和血小板。

sdudai

是类似这个样子的小圆圈么还是其他的样子？这样子的话你的结果可能的原因就是细胞碎片和血小板了，你最好附一张图片。

mmssyyee

是不是ficoll的时间长了？

tianangelt

2013-10-23 11:10 上传

下载附件 (88.95 KB)

附照片一张，请大家指教。

tianangelt

回复 mmssyyee 的帖子
$ @# |( c1 T7 S1 ]2 }! V5 w+ C# V! L* Y2 o! Q8 L. _4 P
Ficoll什么的都是在保质期内，而且后来又用相同的Ficoll操作过，没有出现相同的现象。但是从操作上面也没有发现问题，实验条件也是一样的，不知道是不是血的问题。