不同大肠杆菌感受态的区别

zm19900508

TOP10， DH5a, StbI3 这三种感受态的区别是什么？分别适用于什么情况呢？各位走过路过的童鞋们帮帮忙解答一下啊

weiyepan

PNK 就是 Polynucleotide Kinase，让你先加磷酸基到引物5'端再做连接的意思。我们的确有试过做shRNA连接不做PNK转化不长的现象，尤其是引物质量不好的时候。

zm19900508

回复 weiyepan 的帖子8 ]8 w7 s8 v3 p. {: x
2 P& g) c1 u$ p* R* y& O
什么是PNK再连接，为什么要做PNK再连接？呵呵，麻烦啦

zm19900508

回复 老十 的帖子+ u" o) C( m3 ?3 O! x2 p

8 ?. `* e2 D& a哈哈，找细胞海洋？

weiyepan

回复 zm19900508 的帖子, X8 _; }9 c6 n* x- C" Q# R
& Q' _& x1 n8 [, {( f9 k
Stbl3的效率大概是DH5a的1/10，做得好的话。换一批Stbl3吧，得有10^8cfu/ug以上才好做。  M* ^! K2 i) X( S% m/ g
要不然就是你引物没处理好，最好做个PNK再连接。

老十

晕，点了三下就回了三次，谁能帮忙删了多余的吧。

老十

回复 石山巨石 的帖子7 W2 ]8 B6 e9 d# n
/ {0 z" @- A# d& S' y  c+ O
只要lacZ没被破坏就行。一定要看plasmid 的图谱，puc plasmid 是被改造的很多，是否会留lacZ 不一定。

老十

回复 石山巨石 的帖子
" b5 V! x  F2 y, u
7 y( Q5 O+ A4 z) W只要lacZ没被破坏就行。一定要看plasmid 的图谱，puc plasmid 是被改造的很多，是否会留lacZ 不一定。

老十

回复 石山巨石 的帖子
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6 Q9 g$ \) ?& M$ P只要lacZ没被破坏就行。一定要看plasmid 的图谱，puc plasmid 是被改造的很多，是否会留lacZ 不一定。

zm19900508

回复 wf78365421 的帖子  b) S0 k: M) N& g4 x) o

% @" ]+ R  S* u! E+ x% h4 K5 d师兄说慢病毒载体最好不要用DH5a,很容易发生重组