不同大肠杆菌感受态的区别

zm19900508

TOP10， DH5a, StbI3 这三种感受态的区别是什么？分别适用于什么情况呢？各位走过路过的童鞋们帮帮忙解答一下啊

老十

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。1 N4 ?! V) @$ h0 h; f+ u

& ^1 n/ \$ C& z7 A8 \0 K. i9 E基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA16 e: \3 v! e" ]0 ]' x
TOP10菌株
2 _' b' Q: ^: R6 y  d6 A! e0 e8 b5 n# K
该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
6 `  D5 z/ Q3 J: q+ I, i- E  {4 M' ~! {7 U
基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)， φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74， recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG
! W; L5 U4 Q( L5 ~+ {5 m4 M可以看看别人博客里写的; ]# c# b- k  s2 w/ J4 u9 @) O$ Z
http://bbs.sciencenet.cn/blog-444413-417709.html

weiyepan

DH5a转化效率最高，适用于常规克隆。
9 n3 m2 P/ c' K( `8 Q' f7 cTOP10转化效率低很多，不怎么好用。
3 C* S6 R2 g4 H3 a# Z' C# CStbl3主要用于比较大的质粒，提高其稳定性。

石山巨石

稳定性 stbl3 大于top10大于 DH5a
8 r" q0 t4 A  j; d效率是反过来的

石山巨石

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0 T! `3 u0 ~. k( i# g5 l8 \  p4 C- l+ m* ^( c' Y
请教一下 是所有的pUC系列都可以做蓝白筛选么 还是 只有pUC19可以？

zm19900508

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5 q8 d: I. V" v6 n( [& t# Q: H& x1 {5 S% x/ y, ]! h# @% C
多谢哈

zm19900508

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; v5 T1 |5 O5 @  X+ A, b: d! e2 N2 l' D2 n$ P, x  `8 Q3 G. a
谢啦

zm19900508

回复 weiyepan 的帖子6 m( `" U  }3 n1 T# ]. b
8 m2 u+ y: ?! ]# E
我们实验室一般用的是TOP10，慢病毒载体用StbI3,最近在做一批shRNA,菌批一直没有阳性

wf78365421

DH5a是大肠杆菌的一种菌株。DH5a的感受态是指细胞经过一些特殊方法（电击法、CaCl2法等处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的细胞，即感受态细胞(Compenent cells)。
) v/ G4 ^: i0 uDH5a转化效率最高，适用于常规克隆。
* F- F! L: J" O0 J" g+ G5 d1 @6 e使用建议DH5a

weiyepan

回复 zm19900508 的帖子  H0 o, d# H$ c4 }' ~

8 `/ i! t7 a6 z! b; UshRNA估计也是病毒的载体吧？用Stbl3吧。你是做克隆么？引物退火连接？然后转化没有阳性是么？