不同大肠杆菌感受态的区别

zm19900508

TOP10， DH5a, StbI3 这三种感受态的区别是什么？分别适用于什么情况呢？各位走过路过的童鞋们帮帮忙解答一下啊

老十

DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的β－半乳糖苷酶氨基端实现α－互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。  U5 y+ L0 \: }! a, [, _, S
& z/ a1 }/ m. G2 u  G& n/ Q
基因型：F-，φ80dlacZΔM15，Δ(lacZYA-argF)U169，deoR，recA1，endA1，hsdR17(rk-，mk+)，phoA，supE44，λ-，thi-1，gyrA96，relA1
. L! X0 Y" M: y, P0 \8 fTOP10菌株
' R5 D" E' d* x+ z; k7 k8 [+ T2 ?7 C0 Q! K0 d9 f. E
该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。
( V/ W7 A7 l3 I
9 K" q  R$ g+ @5 C* }# D基因型：F- ，mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC)， φ80 ，lacZΔM15，△lacⅩ74， recA1 ，araΔ139Δ(ara-leu)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG& w! p9 M- O# @( H6 J1 x' H* `
可以看看别人博客里写的
# w6 D# L/ ?" I, ^  D3 @http://bbs.sciencenet.cn/blog-444413-417709.html

weiyepan

DH5a转化效率最高，适用于常规克隆。$ j) J) k1 x. C, y; M( W+ B6 q
TOP10转化效率低很多，不怎么好用。( M! V( H! c& o6 U
Stbl3主要用于比较大的质粒，提高其稳定性。

石山巨石

稳定性 stbl3 大于top10大于 DH5a
* f& G. w; h) o0 s; t效率是反过来的

石山巨石

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$ p5 }* U' Y6 b1 d7 v3 d
$ n: d" B/ r5 K% P. ^5 W请教一下 是所有的pUC系列都可以做蓝白筛选么 还是 只有pUC19可以？

zm19900508

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# V. o/ W5 h- N& A8 f
  G8 b" c, i1 w  ^5 t多谢哈

zm19900508

回复 石山巨石 的帖子0 \' w) L3 {& M1 p. m) _( a; a
# {3 E2 I# _, Y  h* b8 W
谢啦

zm19900508

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$ Q$ z" {6 y% t6 x( G* }7 Q! o: [3 W8 A* e, y
我们实验室一般用的是TOP10，慢病毒载体用StbI3,最近在做一批shRNA,菌批一直没有阳性

wf78365421

DH5a是大肠杆菌的一种菌株。DH5a的感受态是指细胞经过一些特殊方法（电击法、CaCl2法等处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的细胞，即感受态细胞(Compenent cells)。1 S* g6 P8 m/ Y. @
DH5a转化效率最高，适用于常规克隆。4 C) A: M% [. J
使用建议DH5a

weiyepan

回复 zm19900508 的帖子+ ]( l, S, H  y# V

% r6 J% V0 z% H; f9 xshRNA估计也是病毒的载体吧？用Stbl3吧。你是做克隆么？引物退火连接？然后转化没有阳性是么？