人脐带植块培养清洗换液的问题

willow0711

在做脐带植块培养时，细胞爬出时间多数的是人家传代的时间，时间长的要2-3周多，不知道是什么原因。想问下各位大侠：" i8 Q6 E( I' F
1、脐带剥除脐动静脉和外表皮，得到的华氏通胶，是不是要把其多洗几遍，不那么粘稠了细胞才容易往外爬？! Q, {8 a: ~7 P$ q3 h. p
2、植块贴壁后，是半量换液还是全量换液更利于间充干细胞爬出呢？
3 G. v  r4 R, _0 m3 X谢谢！

zhusealin

贴壁后半量换液

mtdj1314

以我的经验，" a5 f" w% k) h
1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗$ ]( T8 G2 B! Z0 X3 s  D
2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于细胞爬出。

willow0711

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) F' E9 C3 m% D, m3 ^) e
7 R7 S- i5 W( b& U% B2 x, w+ s哦，谢谢

willow0711

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9 n; E8 i6 Y4 p' b+ m( G- K
8 K, T2 H/ b% I- o. e哦，谢谢

willow0711

mtdj1314 发表于 2013-12-18 10:33
5 O' r  p3 W0 g( W  N5 b以我的经验，
; A1 M; t8 j4 x& Q1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗
, M$ i5 m( [1 H3 B* V1 ]7 P2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于 ...

$ _  m+ N" r+ h- S5 V1 h9 |& z
那你的方法，一般什么时候细胞爬出？多久传代呢

单个核细胞

$ v7 r* v* [; V! D: Z1 }( ~* K

0 K0 B/ H% y- t0 t回复 willow0711 的帖子) s5 ]: ^4 {" o9 i$ ~4 V" g. w
4 X1 V4 P( e, [  f6 ^
1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；
  W( {% S& F) \9 T7 I) N2.细胞能不能爬出来，个人认为跟你有没有洗涤没有多少关系；
& |  C2 Z4 \  v3 I$ q4 d+ C) L) G3.组织块贴壁3-5小时后，可直接加入完全培养液，放置9-10天后观察，可见少量细胞沿组织块周围爬出，这时候可去除组织块，全量更换新鲜完全培养液，再放置3天左右，首次传代即可。0 t4 H" L/ v+ [- e/ n

# C6 \( c* R7 i# m# O4 W# H附图如下（点击图片可放大）：) |# g: H9 o2 Y3 ?4 F6 V
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willow0711

回复 单个核细胞 的帖子# Y# |: F2 K$ a" |1 H1 `
7 k) `: [, f( D  h; `3 o$ s6 |
哦

willow0711

单个核细胞 发表于 2013-12-18 11:50
, O3 K% `% f. L  t回复 willow0711 的帖子( V# Z3 |4 S9 ]( h

% A* c  W: @6 Q2 T2 ~1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；

0 w) k( g. V, g/ T$ S$ |9-10天中间都不换液吗

zhangshich

有时候细胞就在组织块的底下，组织块脱落有部分细胞贴在板底。其实换液都没有一定，关键是不要让组织块漂浮起来。