人脐带植块培养清洗换液的问题

willow0711

在做脐带植块培养时，细胞爬出时间多数的是人家传代的时间，时间长的要2-3周多，不知道是什么原因。想问下各位大侠：* M: E/ p7 H, y7 R" C
1、脐带剥除脐动静脉和外表皮，得到的华氏通胶，是不是要把其多洗几遍，不那么粘稠了细胞才容易往外爬？
1 L& r, v. ~+ I9 W2、植块贴壁后，是半量换液还是全量换液更利于间充干细胞爬出呢？
. \4 N+ ~2 T" E  F: w谢谢！

zhusealin

贴壁后半量换液

mtdj1314

以我的经验，
- s6 C9 M0 @# p) }1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗
; L8 l( `9 c/ F3 ]) O: u1 [2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于细胞爬出。

willow0711

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# Q8 B2 k% _; g# O; V
' @% }8 Z0 j. j哦，谢谢

willow0711

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3 F  i1 R# n/ t5 c( a5 e: y  i
# M4 v3 [" i' Y  v1 k$ h9 V哦，谢谢

willow0711

mtdj1314 发表于 2013-12-18 10:33 : a4 l& e4 n3 s* b
以我的经验，
5 n. p1 D( v% I- Y2 P: V5 T1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗
* y- N; V, N8 C. l2 Y8 s2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于 ...

$ ]8 \& ]2 h, d9 C2 e4 b那你的方法，一般什么时候细胞爬出？多久传代呢

单个核细胞

6 R  a9 ~3 u% K- \& J4 _& {0 s2 p1 @/ r2 N* r7 @8 K& s" G
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4 u% b; B% s3 X$ C/ v
1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；
& v% A7 I, d& ~2.细胞能不能爬出来，个人认为跟你有没有洗涤没有多少关系；% l5 a4 [* M7 C0 v( {2 f. G7 f
3.组织块贴壁3-5小时后，可直接加入完全培养液，放置9-10天后观察，可见少量细胞沿组织块周围爬出，这时候可去除组织块，全量更换新鲜完全培养液，再放置3天左右，首次传代即可。9 m! i, x' c- z. w
2 _1 Z: _7 ~9 e
附图如下（点击图片可放大）：
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willow0711

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6 f+ e9 D+ M% W2 J4 Y7 o0 U6 f" i/ i% b8 W; R5 b
哦

willow0711

单个核细胞 发表于 2013-12-18 11:50 % V: K) H7 R. N* [; u1 `* }3 R
回复 willow0711 的帖子% J6 k3 ?, b& C7 K. ~4 p

5 A0 v. |# A! @' m1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；

5 r0 O' v( e' ^3 H) I$ a
9-10天中间都不换液吗

zhangshich

有时候细胞就在组织块的底下，组织块脱落有部分细胞贴在板底。其实换液都没有一定，关键是不要让组织块漂浮起来。