心肌分化的paper，共享一下了【原作者发布 欢迎提问】

Jonathan

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http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24564569
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' N+ u% f6 a) [; y5 H看看接收的。有问题可以问我
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海洋注：5楼原文

chips100

心肌最后分化到几天，测的心室肌指标

智露

我现在怎么每次悬滴到悬浮状态中看到的EB好小，不知道为何数目不够，以前做的都很好，我确定计数没有问题，是mES不行吗？

zhouhuaxizhu

这篇文献用的是人的胚胎干细胞或者诱导多能干细胞通过EB做的心肌分化实验，我没有全文权限。我做过几次人的多能干细胞EB法分化细胞，都没有形成EB，我不知道原因在那儿，鼠的就非常容易而且成功获得心肌细胞。请有经验的大侠们不吝赐教。

xiao_jiajia

A simple, cost-effective but highly efficient system for deriving ventricular cardiomyocytes from human pluripotent stem cells.

Jonathan

回复 chips100 的帖子2 Q$ W2 x- q+ k) D. m
( I% t# e9 M, D' h3 |8 j# |. q8 T- S
测指标基本都在30多天测的。主要用patch clamp，其他指标我们直接用auto-patch的机子测其他current

Jonathan

回复 智露 的帖子6 L2 l6 A# v( W4 h( p- R  E6 J' z

! d# T( v: `) ]3 ]7 m) l. V悬滴法是比较原始的。细胞状态很重要。我做的不多。

Jonathan

回复 zhouhuaxizhu 的帖子1 H9 ^  C$ W; V$ F( |; _
0 r7 G: J8 V& L+ E8 Q2 y
你看看我这个paper里面写的方法，效果很好。一个well，可以形成6-12个well的悬浮EB，每个well有大概1000-2000个EB球。EB形成多少和细胞系有关，还和细胞的状态有关

刘森泉

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! T8 N: h+ C8 G5 k; t% R3 [  v! f& v2 ^3 u& R! t6 W! o
请问第1天消化成单细胞后培养在mTesR里，加Matrigel(40 μg/ml)？是固体培养？还有有试过开始几天也常氧培养吗？谢谢。

Jonathan

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7 S! A: y2 K9 [. O( S5 Y9 Y' b4 Q+ y- q& k
消化成单细胞后，加matrigel，其实是用4度的mTeSR1把matrigel溶解。所以肯定还是液体培养。有试过用normaxia的，效果不如hyperxia的好。