求鉴定-诱导分化成脂肪细胞和油红O染色照片

myylovewp

最近刚接触干细胞的诱导分化，用的Gibco的试剂盒。诱导成脂肪细胞20天细胞内左右出现类似油滴的亮点（图一），油红O染色后没有上色。改变染色方法后（没有用60%异丙醇漂洗，仅用水洗），背景没洗干净。可是很少细胞内出现图二的红色，没洗干净的那些杂质是什么？怎样才能除去。求大家帮我鉴定一下，万分感谢！

2014-4-17 14:23 上传

下载附件 (17.69 KB)

2014-4-17 14:25 上传

下载附件 (131.6 KB)
图片二

jane1lee

油红是自己配的吗，最好过滤下

刘慧瑾

挺好的，继续努力

myylovewp

回复 jane1lee 的帖子. q) t) @+ |4 K. c+ I4 i

' |3 j' K4 c" o/ n& [( Y1 f油红O是自己配的。0.5g油红溶于100ml异丙醇里，滤纸过滤保存在4度冰箱。染液用6ml的油红O+4ml水，过滤后静置10min才用的。
. \1 q* a" s, c$ H& V/ a我想请教一下您染色完您是怎么漂洗的？用水还是60%的异丙醇？

myylovewp

回复 刘慧瑾 的帖子4 `; v3 G6 t. X0 R: Z3 G
, q! l4 {2 Z5 z+ Z% o/ L8 |# Z
请教您一下，我图片一里的是油滴吗？怎么染色后细胞外红红的杂质是什么？

huangcong1988

木有成功

沙漠狐o0

重新做一次吧，杂质是油红O颗粒，过滤的时候多加层滤纸试一下。
! P( j/ J2 E4 N3 Z6 ]

myylovewp

回复 沙漠狐o0 的帖子
( h# Y* t9 q5 U3 Q. M1 {. p2 ?9 S0 I8 D
. i" _0 o) L6 u" {谢谢您的解答，我是用单层滤纸过滤后，再用0.22um的过滤器过滤染液的。下次试试多层滤纸过滤

myylovewp

回复 huangcong1988 的帖子: O# V( k4 Z/ T8 z

/ f' B$ n5 F; U- u& d# H谢谢，我再诱导一次试试。

luyue6453

回复 myylovewp 的帖子" ^  {+ v4 W) g- ?
. V: a/ j  U! f5 F; f- ^! j6 R
我现在才开始做诱导实验，不知道您的成功没，你出现的问题解决没？