求鉴定-诱导分化成脂肪细胞和油红O染色照片

myylovewp

最近刚接触干细胞的诱导分化，用的Gibco的试剂盒。诱导成脂肪细胞20天细胞内左右出现类似油滴的亮点（图一），油红O染色后没有上色。改变染色方法后（没有用60%异丙醇漂洗，仅用水洗），背景没洗干净。可是很少细胞内出现图二的红色，没洗干净的那些杂质是什么？怎样才能除去。求大家帮我鉴定一下，万分感谢！

2014-4-17 14:23 上传

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2014-4-17 14:25 上传

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图片二

jane1lee

油红是自己配的吗，最好过滤下

刘慧瑾

挺好的，继续努力

myylovewp

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+ J' [0 h! z/ D1 o- q6 C
# T% A3 `6 z6 A: a' B* d3 N/ o油红O是自己配的。0.5g油红溶于100ml异丙醇里，滤纸过滤保存在4度冰箱。染液用6ml的油红O+4ml水，过滤后静置10min才用的。
- A7 b$ P8 ]/ Y* K# L9 B我想请教一下您染色完您是怎么漂洗的？用水还是60%的异丙醇？

myylovewp

回复 刘慧瑾 的帖子1 q8 B+ r! u! l

: ?2 |+ t4 p3 m9 ]1 O; h+ [& u请教您一下，我图片一里的是油滴吗？怎么染色后细胞外红红的杂质是什么？

huangcong1988

木有成功

沙漠狐o0

重新做一次吧，杂质是油红O颗粒，过滤的时候多加层滤纸试一下。
  F  S* Q. ?- \  V! N2 ]

myylovewp

回复 沙漠狐o0 的帖子' Z+ C# k  Y6 X

" {+ O; L# i8 @+ Y. X5 D% Z谢谢您的解答，我是用单层滤纸过滤后，再用0.22um的过滤器过滤染液的。下次试试多层滤纸过滤

myylovewp

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+ e3 l  g8 F% t+ V& B( z6 c
, ~' n- `- O% F& f6 J* g: y3 [, S# T谢谢，我再诱导一次试试。

luyue6453

回复 myylovewp 的帖子) k6 q2 V9 n% q+ r

; h8 d. O& I. ~4 r) H5 n我现在才开始做诱导实验，不知道您的成功没，你出现的问题解决没？