求鉴定-诱导分化成脂肪细胞和油红O染色照片

myylovewp

最近刚接触干细胞的诱导分化，用的Gibco的试剂盒。诱导成脂肪细胞20天细胞内左右出现类似油滴的亮点（图一），油红O染色后没有上色。改变染色方法后（没有用60%异丙醇漂洗，仅用水洗），背景没洗干净。可是很少细胞内出现图二的红色，没洗干净的那些杂质是什么？怎样才能除去。求大家帮我鉴定一下，万分感谢！

2014-4-17 14:23 上传

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2014-4-17 14:25 上传

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图片二

jane1lee

油红是自己配的吗，最好过滤下

刘慧瑾

挺好的，继续努力

myylovewp

回复 jane1lee 的帖子: j! y2 H5 w$ V9 f" M
% y. Z7 Z  F: m9 ~3 e7 H0 u
油红O是自己配的。0.5g油红溶于100ml异丙醇里，滤纸过滤保存在4度冰箱。染液用6ml的油红O+4ml水，过滤后静置10min才用的。# X% B" s; H, z' }
我想请教一下您染色完您是怎么漂洗的？用水还是60%的异丙醇？

myylovewp

回复 刘慧瑾 的帖子
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6 g9 ]: h/ k7 W- p! ~请教您一下，我图片一里的是油滴吗？怎么染色后细胞外红红的杂质是什么？

huangcong1988

木有成功

沙漠狐o0

重新做一次吧，杂质是油红O颗粒，过滤的时候多加层滤纸试一下。- w" a  R2 f% |9 W1 g

myylovewp

回复 沙漠狐o0 的帖子8 ]3 p# C" ^' E3 I& x
8 A, M% W* n+ Q/ h, j: H, P
谢谢您的解答，我是用单层滤纸过滤后，再用0.22um的过滤器过滤染液的。下次试试多层滤纸过滤

myylovewp

回复 huangcong1988 的帖子
; i4 I; L% o; {, C% b
. N# ?2 o2 e5 D3 @! }谢谢，我再诱导一次试试。

luyue6453

回复 myylovewp 的帖子
/ O( D5 I# e% H+ ~/ N. D
& S- C/ o1 k- f( x' p* G我现在才开始做诱导实验，不知道您的成功没，你出现的问题解决没？