请教如何提高CIK的cd3cd56的阳性率呢

levell

    请问如何能够提高CIK细胞的CD3CD56的表达，勤补液？还是提高某种因子的浓度。我就是常规D0加IFN-g1000U/ML，D1加CD3mAb（50ng/ml）、CD28mAb（50ng/ml）、IL-1A（100U/ml）、IL-2（500U/ml），此后补液只加IL-2（只加入新补液体积的量），细胞增殖、成团都比较好，就是CD56的阳性率不高，我都要怀疑抗体的问题了。
0 K2 i7 }/ ]- \9 b8 u: D    谢谢大家

牵着蜗牛去散步

和勤补液没有关系，是否能够高度的表达CD56取决于你加入的刺激因子和浓度。

levell

我觉得我加的浓度都是常规方法，应该没有什么问题啊，试剂除了T551外都是进口的，不明白怎么回事啊

牵着蜗牛去散步

回复 levell 的帖子* B: ?7 @! X8 ]: g4 g  Y' T! I

$ S- I  L3 E. k0 jT551应该也是进口的。日本TAKARA公司

lyj-0017

回复 levell 的帖子+ B+ g6 H9 E0 Y  I, a* g/ j
5 {( H# v$ d! v" I9 s" W2 u1 U
这个问题应该与各家的工艺有关，使用的因子浓度大家都差不多，关键是这些因子买的都是哪个公司的，以及各家公司因子的组合，再一个就是表型检测的问题，抗体是否是大家都在用的克隆号？流式设置是否正确？后续分析是否正确？这都需要一点一点摸索

lyj-0017

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3 ?9 a% ?' ^' I
1 f( Y0 C0 A8 v另外，想问一下，你做流式用的只有CD3和CD56两种荧光抗体吗？这两种抗体都标的是哪种荧光染料呢？

levell

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7 y! S5 P* H) Z) ?; l% p) G# x2 o$ R- n1 X2 b7 B- a  }1 E$ f7 g5 l0 }
不是啊，还有CD4\CD8，只是这两个做了个双标，一个用PE，一个是FITC

levell

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6 R+ J' _1 H8 L. I. b& J
6 S0 U' l+ }5 x- G. h说的很详细，我再摸索吧，谢谢！

lyj-0017

回复 levell 的帖子8 O% D9 R- R& F6 u0 E  {' a

& Z6 [/ o+ W; `; w& o那你CD3和CD56是如何做的补偿调节呢？

levell

一共四管，PE IgG2a/FITC IgG1，PE IgG2a/CD56，FITC IgG1/CD3，CD3/CD56