请教如何提高CIK的cd3cd56的阳性率呢

levell

    请问如何能够提高CIK细胞的CD3CD56的表达，勤补液？还是提高某种因子的浓度。我就是常规D0加IFN-g1000U/ML，D1加CD3mAb（50ng/ml）、CD28mAb（50ng/ml）、IL-1A（100U/ml）、IL-2（500U/ml），此后补液只加IL-2（只加入新补液体积的量），细胞增殖、成团都比较好，就是CD56的阳性率不高，我都要怀疑抗体的问题了。; }9 A% h: E, N
    谢谢大家

牵着蜗牛去散步

和勤补液没有关系，是否能够高度的表达CD56取决于你加入的刺激因子和浓度。

levell

我觉得我加的浓度都是常规方法，应该没有什么问题啊，试剂除了T551外都是进口的，不明白怎么回事啊

牵着蜗牛去散步

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+ r& J  C% v" p9 T3 ~& H
T551应该也是进口的。日本TAKARA公司

lyj-0017

回复 levell 的帖子) F0 \4 b: Y3 k3 G' Z, A9 R8 t

" J* R5 C7 I( u) A# p这个问题应该与各家的工艺有关，使用的因子浓度大家都差不多，关键是这些因子买的都是哪个公司的，以及各家公司因子的组合，再一个就是表型检测的问题，抗体是否是大家都在用的克隆号？流式设置是否正确？后续分析是否正确？这都需要一点一点摸索

lyj-0017

回复 levell 的帖子- p! p3 S, J9 X) q5 X  o

5 h( S: P: Y2 f0 _/ ?5 F另外，想问一下，你做流式用的只有CD3和CD56两种荧光抗体吗？这两种抗体都标的是哪种荧光染料呢？

levell

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+ y, ]! n. s$ E8 g+ Z2 ?9 g9 }5 Q: z( ^' c- I+ ~, D. I
不是啊，还有CD4\CD8，只是这两个做了个双标，一个用PE，一个是FITC

levell

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& s8 Y3 j/ f2 y9 y8 S5 g0 m; ^说的很详细，我再摸索吧，谢谢！

lyj-0017

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9 @8 @9 ]  K; t  ^$ ~5 U3 w) X; U7 y8 A$ k) R6 i
那你CD3和CD56是如何做的补偿调节呢？

levell

一共四管，PE IgG2a/FITC IgG1，PE IgG2a/CD56，FITC IgG1/CD3，CD3/CD56