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回复 穿越地平线 的帖子
, v' A( [; _" Q& \; }4 v4 g- {8 z) K( {! ] W+ @% Z9 t" O( R
非常感谢您的回复!!!% Y( Y6 o7 k, `% L
现在仍然被EPC原代培养所困扰,有些问题想请教您:
5 `% d9 I$ _: t9 O* F0 v1 P3 B6 v& M1 _我是 冲出骨髓后,破红,将单核细胞悬液先在6孔板中37° 培养半小时,收集未贴壁细胞,按照1X10^7 密度加入到新的vitonectin包被板中,EBM-2(加7个因子和5%FBS的那个)培养, 48h 后去除未铁壁细胞,能看到克隆,7-10天后,能长满孔板,
; r. c2 C: T& U6 ]" C/ @9 }
- ~, k A/ ^, J+ ^7 y! C流式检测CD34,SCA-1阳性,但CD11b也是阳性,flk-1是阴性,成管实验也失败。。。4 [5 s# I) `( N7 y3 N
4 |. J! o/ X# \+ u5 M8 d- z麻烦咨询您一下,我的方法有问题么?出在哪里,请问您是怎么做的?不胜感激!!!!! |
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