实验室SOP

张源

请问你们细胞实验室里用的SOP，怎么制定的 能发份看看吗？

jianglei_sd

SOP是不可能发给你看的！3 r2 W7 \3 L+ V. B7 p

$ g9 z3 u# c; m; v! o做SOP的可以按以下几个步骤来进行：1 ]% P; x! b, J6 i2 P2 U9 [
1.先做流程和程序 : @) p; m/ o3 J3 e  S$ o
按照公司对SOP的分类，各相关职能部门应首先将相应的主流程图做出来，然后根据主流程图做出相应的子流程图，并依据每一子流程做出相应的程序。在每一程序中，确定有哪些控制点，哪些控制点应当需要做SOP，哪些控制点不需要做SOP，哪些控制点是可以合起来做一个SOP的，包括每一个分类，都应当考虑清楚，并制定出来。   
% @/ f0 l# I+ F! A: j1 p$ a2.确定每一个需要做SOP的工作的执行步骤  对于在程序中确定需要做SOP的控制点，应先将相应的执行步骤列出来。执行步骤的划分应有统一的标准，如按时间的先后顺序来划分。如果对执行步骤没有把握，要及时和更专业的人员去交流和沟通，先把这些障碍扫除掉。4 |& v) `6 v/ B# q) P
3. 套用公司模板，制定SOP  在这些问题都搞清楚的前提下，可以着手编写SOP了。按照公司的模板在编写SOP时，不要改动模板上的设置；对于一些SOP，可能除了一些文字描述外，还可以增加一些图片或其他图例，目的就是能将步骤中某些细节进行形象化和量化。    1 ^$ z' a7 \; y9 W  i' ]3 Y
4.用心完善，努力实施 $ ]% I: l. C4 T* ~
由于编写SOP本身是一个比较繁杂的工作，往往很容易让人产生枯燥感觉，但SOP这项工作对于公司来说又非常重要，公司在这方面也准备进行必要的投放，特别是从时间用2到3年的时间来保证，因此我们必然用心去做，否则不会取得真正好的效果，甚至走到形式主义的负面去了。 9 V) }' i$ l$ Y
“认真做事只能把事情做对，用心做事才能把事情做好”，并用这句话和大家共勉

jianglei_sd

, W# F. B0 I6 E( Q5 i+ O# ^  t0 u1 Y7 i# h- `0 y! E0 \
多发了一遍，怎么删掉？

呼吸

一般实验室的SOP都是根据自己实验室的实际情况制定的，怎么制定，制定成什么样要看你们实验室的具体情况

tim1403

实验室的SOP那么多，也不可能全发给你看，而且，每个实验室也不同，所以你可以上百度文库找一些相类似的参考参考
( U" U  S4 |* Z7 S9 S  Z9 |. `http://www.docin.com/p-517020343.html
6 X; O3 C1 h( T5 \' y, H  g9 Rhttp://wenku.baidu.com/link?url=4_6FFDKtzuq-Bzz_srw-v8f72oMsGgauUl1wFOi3VLh2KtwWGfRhbt5RwnPnc6KE-wv1A8a00nukZPxadvzFBaUYvWs3CaQF5I8U4tyAiya1 B  a( W9 J( `. |6 E* h

tim1403

胚胎干细胞培养标准化操作规程(SOP)7 h% M/ c' L+ \- V" j

; S4 M! [  [/ ~" z目录3 Y( T' x' J; g( t; ?1 U% |
一、细胞
+ {! s( p. K* u/ _. k二、一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态
8 t5 [  x1 |, X8 T2 F培养基# Y: J/ m  Z' w) J! ]. [- n
细胞复苏( v+ p8 K9 u0 G" O! l5 ?$ n1 k
冻存细胞7 I+ i  |) A9 n; @) t: `: T
明胶包被* ?3 c0 P4 h& Z) g
细胞传代
; h3 v. j0 ?3 f5 B/ U0 x三、体外分化
  n; m2 z9 Z6 m1 V  _9 k培养基* \. q( i$ h: r& J' t) E1 |2 w8 x
包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片）, H4 y- l7 D) z$ ]7 ]; T' B
体外分化方法
9 }  J" \2 i0 H6 Y/ Q四、移植细胞的准备7 u$ f$ x+ y9 s* D' w2 {9 J( [4 O
+ K% }: _9 M/ h2 t% M! K
细胞
' l% P1 F% v8 U6 n5 M多能性胚胎干细胞产生于小鼠胚泡8 z( B3 t$ _1 A5 v( a- j
1．表达绿色荧光蛋白（EGFP）的B5-ES细胞。由Dr. Nagy的实验室制备。! W1 R) y1 T/ b' a! T( H- U
2．D3-ATCC; CRL-1934. 我们得到时大约传了17代。
) t" j' o/ a' z! z& O. g9 o$ q) Q% B3．J1-由Dr. Jaenish的实验室友情提供。我们得到时大约传了7－9代。
. b4 ~! t( [  _4．J1rtTA-rtTA表达J1细胞，由Dr. Jaenish的实验室友情提供。% I- o/ m( S) S( i% e# G
5．表达黄色荧光蛋白的YC5-ES细胞，由Dr. Nagy的实验室提供。
2 j0 ?0 U5 u: z1 a, C  Z' f9 ^6 z3 s+ i# T8 X0 f' x* o6 f: S. m
一般培养--维持ES细胞处于未分化状态. L( L& j+ M) C* j: f( Q
ES细胞培养用含有ESGRO（白血病抑制因子）的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1％明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2－3天从达到80％－90％融合的平板按1：8的比率传代细胞一次，细胞传代以后，在将细胞接种在0.1％明胶包被的培养皿之前，通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时，使分化细胞粘附，从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃，5％CO2，100％湿度条件下培养。  T' H, x/ j- x* n

. u4 W% \  t+ `7 M8 {/ A' p2 H培养基& u1 Z5 @1 k2 Z
ES:
. G# l# l% R( l; I8 G4 {6 C! P配制一20×不含DMEM，HS，ESGRO的溶液（该溶液也能用于EB培养基--见下文）。分装在50ml FALCON管中，（稀释为2×，每管42ml），贮存在-20℃。通过将21ml该溶液，HS和ESGRO加入450mlDMEM中制备培养基，0.2μm滤膜过滤。贮存于4℃。 注：一瓶DMEM是500ml。
+ k4 C1 Q" s) I& d2 {
5 l+ Q% v! U; V6 _1 K贮存液 . `5 [: X3 y$ O7 X5 R
DMEM(高糖)
5 o6 N  \& R+ B# |马血清（HS） 6 [6 r, P  B) d; c/ K9 e8 [4 |
L-谷氨酰胺（200mM）
) [# u, ], S5 XMEM NEAA（10mM）
9 n, q5 W8 m' B/ fHEPES（1M） 7 H7 W% B* [2 C8 I" @- X
β-巯基乙醇（55Mm）   Y5 w+ p# R, p, Z* U3 B! E- @
PEST - J  s' q7 e/ W/ I; L) J% U2 p1 L
ESGRO 4 l' b& g( V+ C. C

4 I% v) X1 W; B复苏细胞2 M( i4 L. `6 P
细胞被冻存在10％二甲基亚砜（DMSO）中防止结晶的形成，结晶的形成会损害细胞。然而，二甲基亚砜对细胞有毒性，快速的进行细胞复苏是很重要的。2 n  A+ d' j2 G. M4 a1 d! C
" K+ o7 E2 Z* Q4 C
" P$ K8 V0 I  q- n" n. D  x$ p
3．将细胞转移到一15ml Falcon管中；! l1 b) p( z* t( M- W4 Z  f( `
4．加入5ml ES培养基（用培养基冲洗冻存管）；
8 O1 p& ~, d3 a+ ^" i" K1 J/ ]$ \5．离心3分钟；
' @3 q- I3 G& `( q7 d! x6．弃上清，用2ml ES培养基重悬细胞，至少吹打10次；7 V  ^8 p2 g. X* g6 q4 L$ U2 W* \
7．接种在明胶包被（见下文）的6孔或6cm组织培养皿；
  P0 P4 z4 u% K  f: J+ D- ~) D8．孵育。

FYH

这个最好实验室自己制定, 可以因地制宜,因实验者的需求为导向, 兼顾清洁有序高效的目标

chimo100

这个是根据你公司自己的操作来写的，原则上“写你所做的，做你所写的”