实验室SOP

张源

请问你们细胞实验室里用的SOP，怎么制定的 能发份看看吗？

jianglei_sd

SOP是不可能发给你看的！3 e) Z4 A& _7 v) h. s* b
/ o9 f- ?) ]8 r, y0 f
做SOP的可以按以下几个步骤来进行：
; w9 Y/ t! Z+ H3 J1.先做流程和程序 : L1 o# y& x* s7 p4 O; m3 \
按照公司对SOP的分类，各相关职能部门应首先将相应的主流程图做出来，然后根据主流程图做出相应的子流程图，并依据每一子流程做出相应的程序。在每一程序中，确定有哪些控制点，哪些控制点应当需要做SOP，哪些控制点不需要做SOP，哪些控制点是可以合起来做一个SOP的，包括每一个分类，都应当考虑清楚，并制定出来。    5 g: t8 d5 }0 |5 K# x8 L& J: _
2.确定每一个需要做SOP的工作的执行步骤  对于在程序中确定需要做SOP的控制点，应先将相应的执行步骤列出来。执行步骤的划分应有统一的标准，如按时间的先后顺序来划分。如果对执行步骤没有把握，要及时和更专业的人员去交流和沟通，先把这些障碍扫除掉。8 A7 o, d( L; B% O2 }$ M
3. 套用公司模板，制定SOP  在这些问题都搞清楚的前提下，可以着手编写SOP了。按照公司的模板在编写SOP时，不要改动模板上的设置；对于一些SOP，可能除了一些文字描述外，还可以增加一些图片或其他图例，目的就是能将步骤中某些细节进行形象化和量化。   
& g+ @4 Y- }6 u6 H7 N4.用心完善，努力实施 0 k! W. u  Y0 J) C7 T- ~3 ?4 a  z3 |
由于编写SOP本身是一个比较繁杂的工作，往往很容易让人产生枯燥感觉，但SOP这项工作对于公司来说又非常重要，公司在这方面也准备进行必要的投放，特别是从时间用2到3年的时间来保证，因此我们必然用心去做，否则不会取得真正好的效果，甚至走到形式主义的负面去了。
, s2 U  b! W' d$ T/ V4 H. K “认真做事只能把事情做对，用心做事才能把事情做好”，并用这句话和大家共勉

jianglei_sd

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0 |' E1 I2 j5 V% n! \多发了一遍，怎么删掉？

呼吸

一般实验室的SOP都是根据自己实验室的实际情况制定的，怎么制定，制定成什么样要看你们实验室的具体情况

tim1403

实验室的SOP那么多，也不可能全发给你看，而且，每个实验室也不同，所以你可以上百度文库找一些相类似的参考参考; n2 Z- Y$ O6 t5 d% Q! e( d
http://www.docin.com/p-517020343.html
# @( o- q  m" z$ |http://wenku.baidu.com/link?url=4_6FFDKtzuq-Bzz_srw-v8f72oMsGgauUl1wFOi3VLh2KtwWGfRhbt5RwnPnc6KE-wv1A8a00nukZPxadvzFBaUYvWs3CaQF5I8U4tyAiya- d) l% I" Y+ L- S8 }$ t/ \

tim1403

胚胎干细胞培养标准化操作规程(SOP)/ J1 b* U* v* e0 x

' B+ n) F; i- l) u1 L目录
1 I9 U5 `3 g4 L, u一、细胞/ w7 w7 Y" B+ a1 q* b7 d
二、一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态, l+ Y. \# G% @" P7 s  @
培养基
- h$ b  {5 e9 \9 i细胞复苏
( \  c' y6 ~: T  Y6 Y冻存细胞
! D, {: U5 f5 o; w8 \* _+ e明胶包被2 [# L1 Z, i/ }8 q2 s
细胞传代
; b. l& S& _4 r- m. `5 ?三、体外分化3 |7 [* ]+ G9 j( }& {  _
培养基
* ^3 I( m7 W1 l+ ^8 c包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片）
9 E4 \9 u* g# E7 k' `8 @体外分化方法
  v9 D8 q/ B! A9 G% Z0 B* s四、移植细胞的准备
' @1 ?3 n5 ^) Z4 t. `5 E* V/ }8 j6 f  U" C9 Y
细胞
# W( d: T7 Y0 I5 i9 k" ~多能性胚胎干细胞产生于小鼠胚泡" D+ Q1 f" D* X7 I0 j; `, y9 D8 I
1．表达绿色荧光蛋白（EGFP）的B5-ES细胞。由Dr. Nagy的实验室制备。  U6 Q# D5 L# ]. J& ]4 p8 I! Y3 k
2．D3-ATCC; CRL-1934. 我们得到时大约传了17代。3 X' |' f/ ~$ ^/ b
3．J1-由Dr. Jaenish的实验室友情提供。我们得到时大约传了7－9代。
9 r( a& g. C: {4．J1rtTA-rtTA表达J1细胞，由Dr. Jaenish的实验室友情提供。9 D- r, D- n2 c
5．表达黄色荧光蛋白的YC5-ES细胞，由Dr. Nagy的实验室提供。; ~3 t* n: l: |6 J* h) m
* ?  W' E9 e, q/ B3 J
一般培养--维持ES细胞处于未分化状态  `  d/ M# @" }: r8 J. Z! ?
ES细胞培养用含有ESGRO（白血病抑制因子）的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1％明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2－3天从达到80％－90％融合的平板按1：8的比率传代细胞一次，细胞传代以后，在将细胞接种在0.1％明胶包被的培养皿之前，通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时，使分化细胞粘附，从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃，5％CO2，100％湿度条件下培养。
& g# c5 E7 ]# p2 p# \, @' {4 p2 H, k0 P+ b* f+ M6 l
培养基
1 |" E4 Z2 l* b% jES:1 d$ _2 @8 i/ R0 a, Y) [+ `2 r8 l6 ]
配制一20×不含DMEM，HS，ESGRO的溶液（该溶液也能用于EB培养基--见下文）。分装在50ml FALCON管中，（稀释为2×，每管42ml），贮存在-20℃。通过将21ml该溶液，HS和ESGRO加入450mlDMEM中制备培养基，0.2μm滤膜过滤。贮存于4℃。 注：一瓶DMEM是500ml。
+ B- a6 O" F  B' ]. g
$ H3 D6 G" ]- J; i; D/ H. `% d贮存液 3 p& N% {. `2 {4 g8 D6 |
DMEM(高糖)   L* |3 u, F& f
马血清（HS）
9 R: N1 r& I3 c1 D: S2 E1 yL-谷氨酰胺（200mM） - N3 k5 I2 t' x2 B7 e9 ^1 E+ V; ?
MEM NEAA（10mM） ; @! R4 T2 H) R0 e+ `8 R. C. V7 A
HEPES（1M）
1 e) ~! M$ o9 v  V" ^5 tβ-巯基乙醇（55Mm）
- ]1 l4 G0 Q, H. R. W% Q4 p, n9 iPEST
1 G8 u3 q; b2 r8 p3 RESGRO - d! v; e! J* J  t5 _

2 Y9 R' V& y+ |3 m" U复苏细胞0 x% n9 e, v8 @, Z
细胞被冻存在10％二甲基亚砜（DMSO）中防止结晶的形成，结晶的形成会损害细胞。然而，二甲基亚砜对细胞有毒性，快速的进行细胞复苏是很重要的。! l# P# ~8 L, F/ u3 _2 o

- E; O) h: F+ i  x. A3 l$ J$ ~0 ]4 ?. r
! H; \3 d( H% ^+ l2 p: |& B3．将细胞转移到一15ml Falcon管中；) n2 Z. m) u8 |" U* A
4．加入5ml ES培养基（用培养基冲洗冻存管）；7 `5 L% C+ B  O1 }  |7 H
5．离心3分钟；
6 u1 P& }! `) _& U3 \+ ~$ H7 c2 ~6．弃上清，用2ml ES培养基重悬细胞，至少吹打10次；+ `; j+ s  g3 {
7．接种在明胶包被（见下文）的6孔或6cm组织培养皿；0 B  l, Z2 ]1 h4 p
8．孵育。

FYH

这个最好实验室自己制定, 可以因地制宜,因实验者的需求为导向, 兼顾清洁有序高效的目标

chimo100

这个是根据你公司自己的操作来写的，原则上“写你所做的，做你所写的”