实验室SOP

张源

请问你们细胞实验室里用的SOP，怎么制定的 能发份看看吗？

jianglei_sd

SOP是不可能发给你看的！- L) p" \" B+ i- e6 G: k

# g' o8 {, w% B# m& J6 g9 n做SOP的可以按以下几个步骤来进行：  i0 @3 a1 h" _0 `: {2 B
1.先做流程和程序
. @, b6 |6 n3 M. y4 v按照公司对SOP的分类，各相关职能部门应首先将相应的主流程图做出来，然后根据主流程图做出相应的子流程图，并依据每一子流程做出相应的程序。在每一程序中，确定有哪些控制点，哪些控制点应当需要做SOP，哪些控制点不需要做SOP，哪些控制点是可以合起来做一个SOP的，包括每一个分类，都应当考虑清楚，并制定出来。   
3 z, n! v9 M: ^2 |9 S# O6 }8 Y1 Z2.确定每一个需要做SOP的工作的执行步骤  对于在程序中确定需要做SOP的控制点，应先将相应的执行步骤列出来。执行步骤的划分应有统一的标准，如按时间的先后顺序来划分。如果对执行步骤没有把握，要及时和更专业的人员去交流和沟通，先把这些障碍扫除掉。
2 F% f7 y* H# @! V8 A: C 3. 套用公司模板，制定SOP  在这些问题都搞清楚的前提下，可以着手编写SOP了。按照公司的模板在编写SOP时，不要改动模板上的设置；对于一些SOP，可能除了一些文字描述外，还可以增加一些图片或其他图例，目的就是能将步骤中某些细节进行形象化和量化。   
* F* c, W/ @0 e6 ]4.用心完善，努力实施
4 T% I) f' w2 Z  j: o% t, A& \7 s由于编写SOP本身是一个比较繁杂的工作，往往很容易让人产生枯燥感觉，但SOP这项工作对于公司来说又非常重要，公司在这方面也准备进行必要的投放，特别是从时间用2到3年的时间来保证，因此我们必然用心去做，否则不会取得真正好的效果，甚至走到形式主义的负面去了。
: H( k" o: }6 v$ S. J' Z# L “认真做事只能把事情做对，用心做事才能把事情做好”，并用这句话和大家共勉

jianglei_sd

+ C/ X& E8 L; _3 e4 S# F+ F0 m9 c# a4 Y8 b# b# }
多发了一遍，怎么删掉？

呼吸

一般实验室的SOP都是根据自己实验室的实际情况制定的，怎么制定，制定成什么样要看你们实验室的具体情况

tim1403

实验室的SOP那么多，也不可能全发给你看，而且，每个实验室也不同，所以你可以上百度文库找一些相类似的参考参考
7 l* P7 L3 S0 W$ ^' Lhttp://www.docin.com/p-517020343.html
' F0 M3 V! W: t+ thttp://wenku.baidu.com/link?url=4_6FFDKtzuq-Bzz_srw-v8f72oMsGgauUl1wFOi3VLh2KtwWGfRhbt5RwnPnc6KE-wv1A8a00nukZPxadvzFBaUYvWs3CaQF5I8U4tyAiya
' c% \8 S: q1 k8 @/ u; n

tim1403

胚胎干细胞培养标准化操作规程(SOP)
+ u2 ^$ L0 q2 P: }# z7 t1 H: r% H3 |3 x# s
目录
: Q# I6 |0 D4 M( S; [) ^. [: K一、细胞" l1 f4 ?" R$ j4 L! A) K
二、一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态
. U1 M  o3 W" k. C# l培养基5 f0 _2 C8 i+ L
细胞复苏
8 ]0 a, p" l: B# z冻存细胞" m, C0 Y  M$ |# S, q
明胶包被3 M# O) e2 a4 I" |! w
细胞传代
& l: N2 t) B( k; _0 i- l" x三、体外分化
# a$ C" W, ?" o/ n: t+ J& |培养基; G- J! O% M( R8 I
包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片）; o. W- U' i; X0 I3 d( k& `
体外分化方法: Z+ J& c* u3 b" q  W5 D! e
四、移植细胞的准备) t5 ]- ]" v& }  S% q( X

# R' a# d$ n* n8 ?0 F细胞6 a: y; T9 \& E. u3 j1 E
多能性胚胎干细胞产生于小鼠胚泡( h% N; i2 G2 R' _' t4 [
1．表达绿色荧光蛋白（EGFP）的B5-ES细胞。由Dr. Nagy的实验室制备。; i! A" p% z+ s8 k
2．D3-ATCC; CRL-1934. 我们得到时大约传了17代。6 \5 V  Z" {, C- ?8 Y, Y
3．J1-由Dr. Jaenish的实验室友情提供。我们得到时大约传了7－9代。
/ \/ c& k, ^: ^- u: D  g" `5 U/ H4．J1rtTA-rtTA表达J1细胞，由Dr. Jaenish的实验室友情提供。
( c7 A6 Y( a2 L7 W) k) S: t5．表达黄色荧光蛋白的YC5-ES细胞，由Dr. Nagy的实验室提供。
3 D& r3 Y  Q' e+ L( P) o1 M: o1 Y% s% u  ~
/ K8 Y* i- S- j+ {一般培养--维持ES细胞处于未分化状态2 y" x9 \5 N3 w# ?' }
ES细胞培养用含有ESGRO（白血病抑制因子）的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1％明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2－3天从达到80％－90％融合的平板按1：8的比率传代细胞一次，细胞传代以后，在将细胞接种在0.1％明胶包被的培养皿之前，通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时，使分化细胞粘附，从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃，5％CO2，100％湿度条件下培养。" v6 p7 T, T$ x
( d9 j% v1 A( e% W3 s2 L& x7 ?) F
培养基
/ ~$ f# \7 O0 p* f- jES:
* Z. p8 N* }" M1 u4 Q" {+ k配制一20×不含DMEM，HS，ESGRO的溶液（该溶液也能用于EB培养基--见下文）。分装在50ml FALCON管中，（稀释为2×，每管42ml），贮存在-20℃。通过将21ml该溶液，HS和ESGRO加入450mlDMEM中制备培养基，0.2μm滤膜过滤。贮存于4℃。 注：一瓶DMEM是500ml。' H' N4 h/ b4 w  q

4 r9 d/ ]" L, q+ @/ \' i2 x贮存液
. {) \2 v) E9 c2 [+ f6 aDMEM(高糖) ( H' b3 E3 t. D# H
马血清（HS）
: ?) d! i( `, P- ?, H6 mL-谷氨酰胺（200mM）
/ U& K9 W9 V2 _, ~" T4 {1 qMEM NEAA（10mM） . j0 _# v! W0 i+ p( d8 F' w* _6 j. W
HEPES（1M） - k3 m- r, \% Y9 X- X$ W2 O
β-巯基乙醇（55Mm） % u! s, z2 b& A4 E, F" b4 h0 ~" @
PEST
) v3 h: [4 A- T4 J" CESGRO , D, b8 n" [& L
; ~- ?. r5 D7 K' _5 f9 x; ^' g  E
复苏细胞  [9 j! s# J+ H5 K! G; r5 @1 |" \
细胞被冻存在10％二甲基亚砜（DMSO）中防止结晶的形成，结晶的形成会损害细胞。然而，二甲基亚砜对细胞有毒性，快速的进行细胞复苏是很重要的。
9 f! v! S# Y8 Y+ g& O  m5 z- X0 H
$ ]2 }- O& u/ K# g7 V9 U! n3 ], E
% t3 {" U, I- k' \# l" L3．将细胞转移到一15ml Falcon管中；3 m- _* `7 P8 C  \! e! ]6 y' @
4．加入5ml ES培养基（用培养基冲洗冻存管）；5 B% k8 ^, k, x% V% M6 s
5．离心3分钟；
' _8 P- i* o0 C( d6．弃上清，用2ml ES培养基重悬细胞，至少吹打10次；3 Q0 p& g9 Z  @* W. o$ q
7．接种在明胶包被（见下文）的6孔或6cm组织培养皿；8 W" u! T" ~# C) T$ d5 M
8．孵育。

FYH

这个最好实验室自己制定, 可以因地制宜,因实验者的需求为导向, 兼顾清洁有序高效的目标

chimo100

这个是根据你公司自己的操作来写的，原则上“写你所做的，做你所写的”