BMSC腺病毒感染

liukuantj

各位前辈，我目前正在做GFP腺病毒转染兔的骨髓间充质肝细胞，有几个问题想请教下各位前辈。
7 s9 g3 A; b6 i6 m$ l/ ]/ H1，我查了文献，大概腺病毒转染Rabbit的MOI大概在200左右，那呢也就是说，我转染一个T25培养瓶（细胞量约为50万个细胞）的话，需要的病毒颗粒是一亿个病毒活性颗粒，我的GFP腺病毒浓度是1*10e11/ml,那么也就是只需要1ul就够了。我想问下，这1ul的病毒液该如何加入到培养基中，是直接加进去，还是先跟培养基预混后再加入。
8 E0 e) \. t1 t2，一般转染的时间要多久？我上次大概转了24h，可是3天后，荧光依然是很弱。
' ?& M* Z) q" g3，是否需要添加prolygrene?怎么加？- l4 X$ {4 @; P# _( T
4，病毒如何分装比较好，是直接分转成小包装，还是预混培养基后再分装？7 ~9 f: e% [* M
谢谢！

liukuantj

liukuantj 发表于 2014-10-30 20:43 8 ~: i2 o2 V6 @9 _  b& I
各位前辈，我目前正在做GFP腺病毒转染兔的骨髓间充质肝细胞，有几个问题想请教下各位前辈。
" u: Q7 O; v) j! w  f7 \1，我查了文献 ...

' m0 z1 L2 q" G) c/ `! C  L' c& ]4 o谢谢前辈，不知病毒液该如何分装，单独分装，还是跟培养基预混后再分装？我可以吧polybrene一块先和病毒液，以及培养基一块混合后，在分装-80保存？谢谢！