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CIK细胞培养一周死亡   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2014-11-3 11:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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CIK细胞培养细胞提取时数量还可以的,但是培养增殖不是太好,一周后细胞就开始死亡,请问高手们怎么没回事啊?请高手指教
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沙发
发表于 2014-11-3 11:42 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子+ J5 u% c* N0 p* g- W
2 j# v  A5 z8 w  x  {0 |, v
简单说一下培养过程,添加的因子,培养方式(瓶子还是袋子?),你这样问怎么给你找原因?
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藤椅
发表于 2014-11-3 12:45 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子5 \" c& J, P. P$ g2 D2 `; e
% [; t, g% y  j" w, u* k2 ?
楼上说的对,需要具体培养过程和添加的因子,一般CIK的培养周期为2周左右。
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板凳
发表于 2014-11-3 16:55 |只看该作者
啥流程

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报纸
发表于 2014-11-3 18:04 |只看该作者
细胞因子浓度,品牌,激活时间等都会产生影响
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地板
发表于 2014-11-4 11:07 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子
( k1 c% M* P' ?9 ^5 l2 l4 u
+ ^* J) O. c5 O5 q. J3 L  `接种浓度1.1x 106/ml,,第0天加1000单位伽马干扰素,第一天加100ng/mlCD3单抗、1000单位IL-2,以后每3天等量加液,这样培养一周细胞活力就开始下降,因子用的国产的,培养基用的Lonza的,是什么原因呢,是不是接种浓度低呢?请给分析下,谢谢
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发表于 2014-11-4 11:10 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子% z3 [2 V$ O" h% W8 E

2 t8 s6 b) ]  o2 Z4 x/ j1 n1 J" F用的是培养瓶

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发表于 2014-11-4 11:31 |只看该作者
回复 sdzhxq 的帖子
- F% }* S6 T/ S% G3 I/ z$ o! t
& ~: l  G# J! b( n" S+ W7 `4 Q) w接种密度可以再提高一下,细胞因子用国产的没多大问题,CD3单抗最好换成进口的,培养基一般没多大问题。另外,D1天加因子时细胞有无聚团?
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发表于 2014-11-5 09:58 |只看该作者
有照片吗?重复试验了吗?
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发表于 2014-11-5 10:57 |只看该作者
回复 lyj-0017 的帖子
# p7 ?1 h5 f8 j2 k, i( h$ T" @  A. O
D1天细胞有聚集,但没有明显的团块,有细胞团才能说明细胞增殖吗?另外我用的Lonza的培养基需要添加谷氨酰胺吗?您说的接种密度可以再提高一下,密度最好调到多少呢?非常感谢您的回复
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