承接上次细胞传代以后不增值的帖子

jinhaifeng

9 R- E# [9 {" e1 \

4 c1 n' Q3 R2 q$ P8 k，这是消化完以后接种时的形态，显微镜是IX41 4倍镜观察，就是这种细胞接种后基本不增值，是污染的情况吗？这是培养的脐带间充质干细胞

791849046

传代前的细胞密度过低，而且细胞形态很不好哦，传代前的细胞已经没有MSC的标志性形态，还是从新培养吧。

cyagen

回复 倒腾细胞 的帖子+ q/ @' G  d$ a7 w5 K, U4 I
! J! C- b3 b; H4 q+ A
我们的经验4周的比较好提取，脂肪来源的相对难养，二氧化碳浓度需保证5%的

chenchunlei

回复 jinhaifeng 的帖子, A9 j. f3 C3 L' ]

! m$ ]0 e' k  i& b: B你下次再【拍照的时候可以调整一下镜子的白平衡，那样照出来的图片可能好看一些，你这样比人没法给你看，感觉你这个视野下就没有什么细胞，下次上传两张好看些的图片

倒腾细胞

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! b+ W$ W8 V5 W1 N4 ?
5 j6 I5 y3 F% l$ }7 d" j- v0 ~* X4周的？前辈我们一般选2周的~ 前辈脂肪来源的是不是比骨髓来源的好养呢？另外箱子里的二氧化碳浓度满足不了5%对细胞影响大么？

彩云子

消化之前的照片没有对好焦吧，几乎看不到MSC，能看到的成纤维状的细胞状态也很糟糕，老化很严重。这是第几代的细胞？
* D% C2 u# c/ R+ t4 R  b消化传代后的细胞状态也不好，密度太低了。
5 Y) z  q2 j% I+ Q- d还是重新养吧。要好好确定一下细胞培养体系，接种密度。

cyagen

图片看上去基本上没有MSC哦，建议调整下培养体系，大鼠MSC我们一般选择4周龄的，取后肢股骨和胫骨用全骨髓贴壁法进行培养

hefan1234

% ?5 `0 p( `+ `) C4 o$ H

! Z/ s. b8 k' c0 y# r5 s回复 倒腾细胞 的帖子) b+ X# x3 W( F# `) l- H

' \7 C& z' R, F# b我原来以为你培养的是人骨髓间充质干细胞？你是培养小鼠骨髓间充质干细胞吗？培养人骨髓间充质干细胞一般用percoll分离法，小鼠小鼠骨髓间充质干细胞一般用直接培养法（全骨髓培养法）。你把小鼠股骨和胫骨的骨髓腔冲洗干净的话不应该细胞这么少啊，一般在学校实验课都做过啊。而且小鼠骨髓间充质干细胞本来就很难消化，而且长得也慢，一般第5天才进对数期，到9-10天进入平台期，你这照片是第几天拍的啊。

menghy

从消化前的细胞照片看，细胞形态也不好，密度低，这样的很难生长。你要考虑培养基系统，集中密度。

倒腾细胞

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' E+ I1 }. s% m+ |$ g# F# ~7 l5 n5 `$ k; H; P5 K
前辈 一般2、30g的大鼠 接种多大的瓶 密度低了确实没办法长