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楼主: baby00000003
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继续拜托流式达人和免疫细胞资深老师帮忙看图   [复制链接]

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楼主
发表于 2015-2-9 15:26 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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这是CIK细胞培养第13天的流式表型检测,3表示CD3,56表示CD56,iso表示同型对照,SAM表示样本
! L( w0 q+ T( \, c; S想请教各位老师,+ D. x) C9 J2 Y" `: F
1,培养到这个样子就可以进行和加载TAA的DC的共培养了吧?
3 {; U$ s, k% B2,从流式图来看,可不可以理解为“同一群细胞中有一部分CD56明显阳性,其他的CD56阳性弱或者不表达”?) A$ \0 L' C$ v; r6 z
3,如果继续培养下去,CD56的阳性率还会继续升高么?
0 Q$ X3 k9 O3 z  C. n4 [: {, N4,更高的CD56阳性率是不是等于更强的细胞毒性呢?
2 x; Q+ m$ B( l$ O
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沙发
发表于 2015-2-9 16:58 |显示全部帖子
本帖最后由 baby00000003 于 2015-2-9 16:58 编辑 / e4 U! Z9 p9 p5 _" |
! o! t7 M  }, c7 B; G
回复 lzlmiranda 的帖子" ]. R6 ], B' J7 ], }
( Q7 F. ?  Q8 |  T7 h+ i6 d
先说双通道,因为前辈遗留了一堆抗体,都是PE耦联的,不舍得浪费掉,就先凑合用了,这是我第一次做DC-CIK,先不浪费那些好试剂了7 K' ~, S! K' v7 R# x: l6 k$ _
一直在等CD56+比例上去,DC也已经养了13天了,目视外观还算正常,现在没有CD83,准备明天做个CD86,HLA-DR看看( z, @& B" j" y* ^( _' [. B7 V
嗯....就纯数学计算来看,细胞总数一样的时候,CD3=99%,CD56=22%的话,CD3CD56双阳性最低也要21%,这么理解为什么不对呢?
6 @5 w4 {' q/ n$ K; ]! j
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藤椅
发表于 2015-2-10 12:21 |显示全部帖子
回复 dollar007 的帖子
4 @* ]+ B% @, }5 R! Q* c2 K, q. `5 s0 Y
如果“病人血象不好”的话,采血前给他输点IL-2什么的,有用么?( m- r0 g' k  s1 y' ~$ \
或者即使是“平常血象”,输点IL-2能不能更有利于培养CIK呢?
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板凳
发表于 2015-2-11 16:11 |显示全部帖子
回复 lzlmiranda 的帖子
* R, Q; H; }' o2 @! s+ _# g7 l
& a! }4 _$ q# j( m2 G" i. K' h/ t" s  k感谢前辈悉心教导~
/ R; s8 W2 i8 v4 T& @" _0 f8 M
) I2 q6 z+ A: p) A8 e继续请教,如果DC不能养太久,而CIK的CD56又迟迟上不去,这时候DC要如何处理呢?冻存?8 v& ?, M, s. X: G3 L7 ^1 C6 I
DC的部分需要过流式看看比例么?
( G: N  m( s0 ]8 C, ^) v比如CD83、CD86什么的......一般需要达到多少比例才算OK呢?
5 C1 `) C5 n. z# h今天把剩下继续养的CIK和DC都跑了下流式,感觉养的越久,阳性率越高呀......
7 K6 n' d# E9 ]" G而且就取样计数来说,细胞增长速率是从D12左右开始呈现指数型增长的,是不是细胞增长速率达到峰值的时候算是细胞质量最好的时候呢?
8 g" `' A# U( d$ ?
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