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人骨髓、脐带血分离提取新方法:
% P0 @1 ^7 Q. c1 F; h2 T[分离、纯化后的干细胞检测] ! ^: K" g7 `1 K6 s- W, H
1、细胞存活率检测:使用溴芬蓝染色法。 3 Z$ |( H9 @2 M! d5 F
2、所提取的细胞总数计算 7 H/ z: H: v6 Z n7 y5 G
★细胞计数板计数法 ! o5 o% @' u7 ^4 H
★血球计数仪计数法
- C" U" F6 Z- z, A# u) R7 k3、干细胞的定性测定
3 M' A! y D' t/ v8 G" N★培养扩增法 5 g: Z6 p4 x# T3 d9 ?8 P5 l
★流式细胞仪检测法,用已知抗原标记后测定。CD34+、CD117+、CD133+、C-kit+、 Sca-1+
; H1 Z$ n/ V# j% w
, j9 `' q: j. S& B# | 负收集混合法
* w" a1 s, R+ R分离的/ S. ^8 ^* {; X% u$ u
原理 选择性的除去红细胞、血小板、全部的血浆物质、成熟的白细胞、
" [9 r0 B& B5 k% h8 P" x2 @淋巴细胞。保留Lin-细胞. V: ?/ ~) ~* g% X# I b" N
0 E+ r4 R& V4 B# v- R/ @! E
靶细胞表面标记物 无6 D& g' x& |2 {; @0 L0 Y5 w/ {
收集的靶细胞种类 能收集所有Lin-干细胞/祖细胞
) h4 e( b5 E1 L3 I/ w$ @* G! n1 _, G. J
最小体积 0.5ml, I* N+ c% [9 u9 u% X( E
动员剂 不需要# p& \) q+ h' ?4 g* i
血浆残留 无
( x' x! G" e/ e A3 O2 P" j3 F2 B; |5 B( S分选对象 骨髓、脐带血
& H! r: \# c% N. e3 i7 I N8 r9 ^细胞
3 D# I7 ]% L) W# h# k* d回收率 ≥85%
- i- K1 w" X7 F- L7 ]3 r5 \细胞
7 t+ Y4 T- d# M存活率 ≥98% |
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