胎牛血清培养转无血清培养间充质干细胞

莫邪小仙

最近做有血清转无血清培养，细胞总是死掉。大家帮忙分析一下，具体操作如下：1.复苏之前冻存的有血清培养的细胞，传代培养。2.待细胞状态较好时收集细胞，用无血清培养基洗两次，再重悬接入新瓶，加入无血清培养基培养。3.但是第2天细胞就死光光了。。。
) d3 a3 X; W# }# ]6 d加大接种密度也不行，另外好多人都说要进行无血清梯度培养，但是那样要经过好几次传代，能有什么办法直接从有血清培养直接转到无血清培养，并且细胞不全部死完的？

莫邪小仙

回复 wuxiao101325 的帖子1 E6 _( L2 h& j; `" T( P4 U
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不是自己配的，是买的商品化的，里面有双抗和因子用的时候直接加进去就可以了。没有铺基质，用的nest的瓶子。

莫邪小仙

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培养基是买的，厂家说没有遇到过这种情况。。。你不知道有多惨，细胞死的我都心疼，刚养出来的就被无血清祸害死了

莫邪小仙

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) J$ A) U1 A3 ~3 j! s9 b1 K/ x从10%转到5%又转到1%，细胞还是死了。。怎么办

莫邪小仙

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0 t- T7 Y% g1 u1 \. z: s是逐步减少血清量的，细胞还是耐受不住又都死了，有什么好的办法没