有关ES培养的请教大师啊

mg1551

为什么我养的ES总是漂啊？无论是OG2还是E14

dmz

对不起，是0.2%galetin

dmz

如果贴壁效果不好，Galetin浓度可以提高到2%，或更高一些

mg1551

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' C0 Q% e9 Y2 m, n  D8 f9 q
) _9 |6 l: C: \/ R& sGelatin

芦苇浅

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; v/ \3 u& D5 W, x8 W+ N: j, T! b9 R7 s7 f9 p+ a. `' D
我们一般feeder-free 的条件使用Matrigel包被的。你说转一下板会好，说明你以前用的板子可能有问题，我们的实验中很少会出现大量的克隆无法贴壁的现象，有几个漂的也是正常现象吧

dmz

可以尝试加点Knockout Serum试试看

mg1551

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& a+ X2 E4 a4 U0 z# I: Q7 D8 d
8 f! z& n# B2 j1 c# x5 b( E8 R恩恩是的，所有因子都加了，就是漂的厉害，重新铺gelatin，转一下盘会好一些 ，但是还是 有一小半的漂着

芦苇浅

这是人的还是小鼠的ES啊，两种ES medium中添加的因子不太一样，我们使用的人的ES medium中需bFGF和LIF，而小鼠的还需要添加2i，克隆形态会更好一些。形态上看你这应该是鼠的ES吧？

dmz

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) S3 |6 t: p7 a' u: L- ^; X, O
5 f: U' }; ?: [0 \3 O8 y细胞状态挺好的。请问您培养皿的皿底是用什么基质包被的？Gelatin，Matrigel 还是Laminin？

mg1551

回复 cloudycity 的帖子8 n3 q* w6 _/ I( d
7 \& @0 \7 g, C0 F6 b3 P' w
都加了啊，师姐他们的技术好一点，但是也是有漂的