有关ES培养的请教大师啊

mg1551

为什么我养的ES总是漂啊？无论是OG2还是E14

cleargreat

存在的问题可能很多。可能不是es哦，，先做个流式鉴定一下吧。或者上图。

dmz

有可能是培养液的问题，可以上图看看

cloudycity

1.有没有检测过支原体之类的？( O9 J7 |* d% v8 n) A; {) R
2.是feeder 还是 feeder-free 模式？如果是 feeder-free 2i 等小分子加了吗？我记得有一次我忘加LIF了，全飘了。还有，最好用好一点的血清···反正这些弄对了，我的e14都停不下来了~

mg1551

" u$ P) Y+ h) U& o

# s7 E4 c3 b1 V+ M; N; R$ U5 B回复 cleargreat 的帖子
0 o, D* j5 J3 N: i" W! f6 m- s# L* d# L# K, x( A

mg1551

7 X$ s& K0 o6 e+ Z5 J) `% y

) w7 m) K" U! {; K. y回复 dmz 的帖子. ?" K8 v6 B/ x$ u& Y- g

% ]- w0 G' x" A' L9 p  G' {这个是OG2的ES细胞

mg1551

回复 cloudycity 的帖子7 v' Q  a$ F2 Q% y+ k% O  f2 f
' V, K$ o9 U# A# J' k% }# t4 b
都加了啊，师姐他们的技术好一点，但是也是有漂的

dmz

回复 mg1551 的帖子. t6 m3 B1 G7 o2 i

; B' _3 X7 z- A2 b% \: j" V; A; H细胞状态挺好的。请问您培养皿的皿底是用什么基质包被的？Gelatin，Matrigel 还是Laminin？

芦苇浅

这是人的还是小鼠的ES啊，两种ES medium中添加的因子不太一样，我们使用的人的ES medium中需bFGF和LIF，而小鼠的还需要添加2i，克隆形态会更好一些。形态上看你这应该是鼠的ES吧？

mg1551

回复 芦苇浅 的帖子
) P7 f/ E- n) h# J* i' s2 \, M9 F- w7 D6 }: X2 A
恩恩是的，所有因子都加了，就是漂的厉害，重新铺gelatin，转一下盘会好一些 ，但是还是 有一小半的漂着