有关ES培养的请教大师啊

mg1551

为什么我养的ES总是漂啊？无论是OG2还是E14

cleargreat

存在的问题可能很多。可能不是es哦，，先做个流式鉴定一下吧。或者上图。

dmz

有可能是培养液的问题，可以上图看看

cloudycity

1.有没有检测过支原体之类的？
8 h" y6 R' ^3 K2 ^. m2.是feeder 还是 feeder-free 模式？如果是 feeder-free 2i 等小分子加了吗？我记得有一次我忘加LIF了，全飘了。还有，最好用好一点的血清···反正这些弄对了，我的e14都停不下来了~

mg1551

  o' E9 H" k0 {1 h+ X

1 q! ~8 v$ i% J/ {* G$ o5 l回复 cleargreat 的帖子
5 M- s+ l* u5 t# H' b& S5 D
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mg1551

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这个是OG2的ES细胞

mg1551

回复 cloudycity 的帖子
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都加了啊，师姐他们的技术好一点，但是也是有漂的

dmz

回复 mg1551 的帖子$ v0 z  V. \' W: [. t1 C1 \, q
( M# |: ~' ?1 p7 f, n/ L1 Y+ B
细胞状态挺好的。请问您培养皿的皿底是用什么基质包被的？Gelatin，Matrigel 还是Laminin？

芦苇浅

这是人的还是小鼠的ES啊，两种ES medium中添加的因子不太一样，我们使用的人的ES medium中需bFGF和LIF，而小鼠的还需要添加2i，克隆形态会更好一些。形态上看你这应该是鼠的ES吧？

mg1551

回复 芦苇浅 的帖子$ O1 E9 M/ r4 `1 j& X
  r6 o, ^+ X, E2 V
恩恩是的，所有因子都加了，就是漂的厉害，重新铺gelatin，转一下盘会好一些 ，但是还是 有一小半的漂着