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求教paraformaldehyde (PFA)-fixed MSC 这是什么意思?记得共培养是用丝裂霉素处理? [复制链接]

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发表于 2015-3-18 08:52 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
本帖最后由 细胞海洋 于 2015-3-18 10:03 编辑 0 q3 I1 o+ a  q, }% D9 H# r
6 U0 w8 G8 Q- G5 o7 F/ l# U% A3 L
Carboxyfl uorescein succinimidyl ester (CFSE;& [4 }4 B0 _+ R9 J  E" {
Invitrogen)-labeled PBMC were cultured at) r3 u& K! E1 O( _* L
400 000 cells/well in a 24-well plate with cultured,0 `& n) P5 {9 ?6 E3 Q
freshly thawed or paraformaldehyde (PFA)-fi xed* _. M4 m7 P( h
MSC at a ratio of MSC:PBMC of 1:3 and 1:9. T: e$ K) i# U! b, O6 q" Y
lymphocytes were stimulated using 0.4 μ g/mL antihuman
9 W* _+ v& Q  O* e+ LCD3 and CD28 antibodies (clone HIT3a) H" ^. ~3 q) t
and CD28.2, respectively, from BD Pharmagen,0 f% C* w2 d$ C/ c/ ?2 d7 B
Mississauga, ON, Canada). T-cell proliferation was( J1 d1 a* {8 Z- B7 l
determined 4 days later by fl ow cytometry analysis
7 E  N$ i5 c# g3 g- Q1 U) Wof CFSE fl uorescence intensity.
( p4 i" h. A2 c2 j4 u3 h! {; D4 g; _# N
paraformaldehyde (PFA)-fixed MSC 这是什么意思?记得共培养是用丝裂霉素处理?
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沙发
发表于 2015-3-18 09:40 |只看该作者
丝裂霉素是处理PBMC的吧。
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藤椅
发表于 2015-3-18 10:13 |只看该作者
回复 cleargreat 的帖子
" R8 V( {% b! S! z  o$ Q- S9 k5 u2 m2 s0 L; {4 S, P. w
如果用丝裂霉素处理PBMC的话,怎么研究MSC对PBMC的增值抑制作用
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板凳
发表于 2015-3-18 10:31 |只看该作者
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这说的是PFA固定过的MSC吧···8 }# v3 f2 i8 l; @, [2 E1 V
但是一般灭活都是用丝裂霉素或是射线灭活,PFA还真没用过···
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报纸
发表于 2015-3-18 11:22 |只看该作者
回复 cloudycity 的帖子
4 M& b; K0 u) N0 n2 `& J( I6 P6 F" b% h* G
MSC为何要用PFA固定呢?
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