求助：关于质粒转染

yinchong42

请问质粒转染时，其表达的基因最多能在细胞中维持几天？如果是体内质粒转染，最多能在动物体内维持多久呢？2 J% T5 |# ]# U4 S* u. o
非常感谢！

cyz3057

据我所以质粒一般用来做瞬时转染，转染24h就得做后续试验，而且不能用于动物实验，做动物实验你为什么不用慢病毒做稳转呢

芦苇浅

据经验，一般细胞系中瞬转72h也是有表达的，但是得考虑一点就是细胞在增殖的同时会丢掉瞬转的质粒。

yinchong42

回复 cyz3057 的帖子
" I* W; Z. o  e3 }% p% b9 G7 |2 i! _$ }& \
主要问题就是没有慢病毒…

yinchong42

回复 芦苇浅 的帖子
. B( `3 ~2 M/ {: s- P
7 m1 B! U7 u5 E就是说，如果体内转染的话，细胞如何在体内增殖很慢，是会稳定很长时间的是吗？

yinchong42

回复 cyz3057 的帖子
5 s: C7 y1 v" k9 s3 K: W
3 K) k; C3 {. I! V1 k) O而且还有报道说，其实体内质粒转染要比病毒更可靠，至少它不需要考虑病毒本身的副作用

芦苇浅

回复 yinchong42 的帖子
' g# K6 V3 |5 b& B
! p7 d! P$ I5 b5 _  b; L这个对于细胞增殖慢的情况还真的不太清楚，不过我认为也不会稳定太长时间吧，细胞会有一定的机制清除外源核酸，所以时间长了外源质粒可能就被清除了。你可以查一下相关文献，一般稳定表达的话在体内注射病毒是可以实现稳定整合的，但是瞬转质粒我倒是没有看到过相关报道。大家可以多发表一下自己的看法

cyz3057

回复 yinchong42 的帖子
' C  ?% p- R& t  F$ R
: z$ L& @) ]$ C+ _4 D; l4 L& k' i这个应该不是的吧 一般成品的腺病毒转染效率高 并多用于动物实验 其实我也是没有病毒 主要是贵和等的时间太久了

yinchong42

回复 芦苇浅 的帖子
, H2 Y) b. D8 K/ g6 ~4 X; i) p1 a! d6 {) l
以前我也是不相信瞬时转染能维持那么久，但是上个月听报告有人用体内电转，维持了28天还能做出wb条带，我自己的实验也发现给药一次就有很显著的变化，所以才问的。。

yinchong42

回复 cyz3057 的帖子* e8 `3 x# P% w  O4 g

6 S2 i/ K' B3 J0 [# l& h% w可能也是因为以前没有可靠的体内质粒转染方法才依赖病毒的吧，现在体内电转开始越来越多了，