求助：关于质粒转染

yinchong42

请问质粒转染时，其表达的基因最多能在细胞中维持几天？如果是体内质粒转染，最多能在动物体内维持多久呢？
, l5 R5 z$ B, o非常感谢！

cyz3057

据我所以质粒一般用来做瞬时转染，转染24h就得做后续试验，而且不能用于动物实验，做动物实验你为什么不用慢病毒做稳转呢

芦苇浅

据经验，一般细胞系中瞬转72h也是有表达的，但是得考虑一点就是细胞在增殖的同时会丢掉瞬转的质粒。

yinchong42

回复 cyz3057 的帖子+ W+ h" o. ?7 m4 k

  t- f- s1 ]4 `# f5 B主要问题就是没有慢病毒…

yinchong42

回复 芦苇浅 的帖子
" a5 o) J5 R/ j9 w. W. ~
) j! u" o+ i' i, a就是说，如果体内转染的话，细胞如何在体内增殖很慢，是会稳定很长时间的是吗？

yinchong42

回复 cyz3057 的帖子
: I3 _  t8 N4 a0 |3 t  w+ i
( ~1 @4 r- B) \8 u6 u6 A而且还有报道说，其实体内质粒转染要比病毒更可靠，至少它不需要考虑病毒本身的副作用

芦苇浅

回复 yinchong42 的帖子% Y7 E, b# c/ @: j) D

4 _2 s& g; q" y+ w2 s4 G* u这个对于细胞增殖慢的情况还真的不太清楚，不过我认为也不会稳定太长时间吧，细胞会有一定的机制清除外源核酸，所以时间长了外源质粒可能就被清除了。你可以查一下相关文献，一般稳定表达的话在体内注射病毒是可以实现稳定整合的，但是瞬转质粒我倒是没有看到过相关报道。大家可以多发表一下自己的看法

cyz3057

回复 yinchong42 的帖子, J* H8 b6 V8 i# T4 ?6 I# W* G1 z2 M
) B& b4 Z/ K  j9 W. Q+ O8 h
这个应该不是的吧 一般成品的腺病毒转染效率高 并多用于动物实验 其实我也是没有病毒 主要是贵和等的时间太久了

yinchong42

回复 芦苇浅 的帖子
, K! W5 F- D+ S, p, d7 Z9 s0 M# |/ Q. o9 [
以前我也是不相信瞬时转染能维持那么久，但是上个月听报告有人用体内电转，维持了28天还能做出wb条带，我自己的实验也发现给药一次就有很显著的变化，所以才问的。。

yinchong42

回复 cyz3057 的帖子
: o5 e! n. v! A' }$ F, H/ |! u5 V! y/ [. q: M
可能也是因为以前没有可靠的体内质粒转染方法才依赖病毒的吧，现在体内电转开始越来越多了，