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求助:关于质粒转染 [复制链接]

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楼主
发表于 2015-5-16 13:42 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请问质粒转染时,其表达的基因最多能在细胞中维持几天?如果是体内质粒转染,最多能在动物体内维持多久呢?8 |4 ]2 |* X" O
非常感谢!
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沙发
发表于 2015-5-17 18:45 |只看该作者
据我所以质粒一般用来做瞬时转染,转染24h就得做后续试验,而且不能用于动物实验,做动物实验你为什么不用慢病毒做稳转呢
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藤椅
发表于 2015-5-17 20:45 |只看该作者
据经验,一般细胞系中瞬转72h也是有表达的,但是得考虑一点就是细胞在增殖的同时会丢掉瞬转的质粒。
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板凳
发表于 2015-5-18 14:42 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
回复 cyz3057 的帖子8 ?. N1 B) y! T5 ?" g5 u5 ]+ _" x
4 N6 d# ?* `9 A5 C  ?% M9 B# F2 K
主要问题就是没有慢病毒…

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报纸
发表于 2015-5-18 14:44 |只看该作者
回复 芦苇浅 的帖子; [% {% a7 @6 E2 p

& J* V: x" Q  D( r  Q' Q就是说,如果体内转染的话,细胞如何在体内增殖很慢,是会稳定很长时间的是吗?
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地板
发表于 2015-5-18 14:45 |只看该作者
回复 cyz3057 的帖子
/ p8 G1 |0 g1 ^+ R# f. T8 O
" i( z; u3 `' M# |: t, ]# G而且还有报道说,其实体内质粒转染要比病毒更可靠,至少它不需要考虑病毒本身的副作用
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发表于 2015-5-18 19:47 |只看该作者
回复 yinchong42 的帖子7 k4 d& N$ k) Z2 l& {6 l
% ^& k2 z3 i- O3 m0 Q9 f! d
这个对于细胞增殖慢的情况还真的不太清楚,不过我认为也不会稳定太长时间吧,细胞会有一定的机制清除外源核酸,所以时间长了外源质粒可能就被清除了。你可以查一下相关文献,一般稳定表达的话在体内注射病毒是可以实现稳定整合的,但是瞬转质粒我倒是没有看到过相关报道。大家可以多发表一下自己的看法
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发表于 2015-5-19 11:57 |只看该作者
回复 yinchong42 的帖子
6 k7 F) i* u+ ?. a8 R% b, C7 t" E/ W6 S) H9 c5 y
这个应该不是的吧 一般成品的腺病毒转染效率高 并多用于动物实验 其实我也是没有病毒 主要是贵和等的时间太久了
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发表于 2015-5-19 15:28 |只看该作者
回复 芦苇浅 的帖子
" C; |9 C, G) ~8 u" c; Q5 N: X; n3 t; c0 `, Z9 q7 A
以前我也是不相信瞬时转染能维持那么久,但是上个月听报告有人用体内电转,维持了28天还能做出wb条带,我自己的实验也发现给药一次就有很显著的变化,所以才问的。。
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发表于 2015-5-19 15:29 |只看该作者
回复 cyz3057 的帖子7 E: J2 Z) B9 J1 i1 ^8 g/ J
$ ^# p3 g; @. R- o% I+ k( ?2 E
可能也是因为以前没有可靠的体内质粒转染方法才依赖病毒的吧,现在体内电转开始越来越多了,
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