求助：关于质粒转染

yinchong42

请问质粒转染时，其表达的基因最多能在细胞中维持几天？如果是体内质粒转染，最多能在动物体内维持多久呢？0 R  N# f8 W. [
非常感谢！

cyz3057

据我所以质粒一般用来做瞬时转染，转染24h就得做后续试验，而且不能用于动物实验，做动物实验你为什么不用慢病毒做稳转呢

芦苇浅

据经验，一般细胞系中瞬转72h也是有表达的，但是得考虑一点就是细胞在增殖的同时会丢掉瞬转的质粒。

yinchong42

回复 cyz3057 的帖子1 s0 \' Y, _6 K" y- x

. Z- y/ U) m4 f6 T  I* U. G主要问题就是没有慢病毒…

yinchong42

回复 芦苇浅 的帖子( y2 f4 B! c5 a; x5 D
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就是说，如果体内转染的话，细胞如何在体内增殖很慢，是会稳定很长时间的是吗？

yinchong42

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5 L$ G: e8 b- V) A' H
" k! z: t8 _+ y: J而且还有报道说，其实体内质粒转染要比病毒更可靠，至少它不需要考虑病毒本身的副作用

芦苇浅

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8 N' d; k0 \! G+ d1 J/ J: e" ]2 E: Q$ `  n2 y* r. ?
这个对于细胞增殖慢的情况还真的不太清楚，不过我认为也不会稳定太长时间吧，细胞会有一定的机制清除外源核酸，所以时间长了外源质粒可能就被清除了。你可以查一下相关文献，一般稳定表达的话在体内注射病毒是可以实现稳定整合的，但是瞬转质粒我倒是没有看到过相关报道。大家可以多发表一下自己的看法

cyz3057

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5 Y+ t9 X. c! K9 A  D. Q8 s
$ k% C7 I$ v: `9 o% ?这个应该不是的吧 一般成品的腺病毒转染效率高 并多用于动物实验 其实我也是没有病毒 主要是贵和等的时间太久了

yinchong42

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以前我也是不相信瞬时转染能维持那么久，但是上个月听报告有人用体内电转，维持了28天还能做出wb条带，我自己的实验也发现给药一次就有很显著的变化，所以才问的。。

yinchong42

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; B3 ?6 y) N9 R" ~$ A可能也是因为以前没有可靠的体内质粒转染方法才依赖病毒的吧，现在体内电转开始越来越多了，